[发明专利]脐带间充质干细胞的大量培养方法有效
| 申请号： | 201510423138.7 | 申请日： | 2015-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN105112360A | 公开（公告）日： | 2015-12-02 |
| 发明（设计）人： | 曾宪卓;黄海军 | 申请（专利权）人： | 深圳爱生再生医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脐带 间充质 干细胞 大量 培养 方法 | ||
1.一种脐带间充质干细胞的大量培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
获取脐带沃顿胶；
将所述脐带沃顿胶进行P0代培养至细胞融合度为40％～50％；
将所述P0代培养的细胞传P1代培养至细胞融合度为85％～95％，收获P1代细胞；
将所述P1代细胞于平板培养基进行接种培养，分离未被平板培养基粘附的悬浮细胞；
将所述悬浮细胞于含有白血病抑制因子和成纤维样生长因子的培养基传P2代培养。
2.如权利要求1所述的脐带间充质干细胞的大量培养方法，其特征在于，将所述P1代细胞于平板培养基进行接种培养之前，还包括：
将所述P1代细胞用质量百分浓度为0.2～0.3％的制胰蛋白酶-EDTA消化处理。
3.如权利要求1或2所述的脐带间充质干细胞的大量培养方法，其特征在于，将所述悬浮细胞传P2代培养的过程中，培养基中成纤维样生长因子的浓度控制2～4μg/L。
4.如权利要求1或2所述的脐带间充质干细胞的大量培养方法，其特征在于，将所述悬浮细胞传P2代培养的过程中，采用含8～12％FBS的DMEM/F12培养基和人脐带间充质干细胞培养基进行交替换液。
5.如权利要求1或2所述的脐带间充质干细胞的大量培养方法，其特征在于，将所述悬浮细胞传P2代培养的过程中，按照1：4～1：10的传代比率进行传代。
6.如权利要求1或2所述的脐带间充质干细胞的大量培养方法，其特征在于，获取所述脐带沃顿胶步骤中，所述脐带沃顿胶的尺寸为2～3mm3。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳爱生再生医学科技有限公司，未经深圳爱生再生医学科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510423138.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
