[发明专利]表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法有效
申请号: | 201510423890.1 | 申请日: | 2015-07-20 |
公开(公告)号: | CN105087691B | 公开(公告)日: | 2018-04-17 |
发明(设计)人: | 刘晓华;李海星 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12P7/64 | 分类号: | C12P7/64;C12N11/04;C12R1/245 |
代理公司: | 南昌新天下专利商标代理有限公司36115 | 代理人: | 施秀瑾 |
地址: | 330031 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表面活性剂 包衣 菌体 催化 合成 共轭 油酸 异构体 方法 | ||
1.表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法,其特征是包括以下步骤:
(1)收集处于对数生长期的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)CGMCC 1.574菌体,按每克湿菌体重悬于5mL透性化处理液中计,将湿菌体重悬于透性化处理液中,重悬菌体经37℃处理20min,离心收集透性化菌体;
(2)透性化菌体用60mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后,离心收集菌体,按每克湿菌体重悬于20mL60mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中计,将透性化湿菌体重悬于磷酸盐缓冲液中,再向其中滴加表面活性剂,边加边混合均匀,于4-40℃处理2-6h,离心收集菌体,将菌体冷冻干燥后得到包衣菌体;
(3)按每克冻干包衣菌体加入到500mL正己烷中计,将包衣菌体加入到正己烷中,搅拌均匀,加入正己烷体积百分比0.1-0.3%的亚油酸,在4-40℃下反应1-12h;
(4)离心分离包衣菌体,将正己烷溶液进行减压蒸馏,回收正己烷,产物为c9,t11-共轭亚油酸异构体;
步骤(1)所述的透性化处理液含体积百分比0.5-3.0%的曲拉通X-100,20-200mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液;
步骤(2)所述的表面活性剂为含质量百分比1%谷氨酸双油醇酯核糖醇的丙酮溶液。
2.根据权利要求1所述的表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法,其特征是所述的步骤(1)中透性化处理液为含体积百分比1.0-2.0%的曲拉通X-100,30-100mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液。
3.根据权利要求1所述的表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法,其特征是所述的步骤(2)中表面活性剂的滴加量为每50mL菌悬液加入5-15mL表面活性剂。
4.根据权利要求1所述的表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法,其特征是所述的步骤(2)中处理温度为4-25℃。
5.根据权利要求1所述的表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法,其特征是所述的步骤(2)中处理时间为3-5h。
6.根据权利要求1所述的表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法,其特征是所述的步骤(3)中加入正己烷体积百分比0.125-0.25%的亚油酸,在15-30℃下反应2-6h。
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