[发明专利]一株重组谷氨酸棒杆菌及其在生产5-氨基乙酰丙酸中的应用

权利要求书

1.一株重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述重组谷氨酸棒杆菌命名为谷氨酸棒杆菌SEAL，其基因型为：谷氨酸棒杆菌ATCC13032/pec-SthemA^M-EchemL，由如下方法制得：先克隆得到EchemL基因和突变基因SthemA^M，构建含SthemA^M和EchemL基因的共表达载体pec-SthemA^M-EchemL，将所构建的重组质粒pec-SthemA^M-EchemL电转入野生型谷氨酸棒杆菌中，得到过量表达SthemA^M和EchemL基因的重组谷氨酸棒杆菌，命名为谷氨酸棒杆菌SEAL；其中，所述EchemL基因来源于大肠杆菌，所述SthemA^M是来源于亚利桑那沙门沙门氏菌的hemA基因的突变体，所述表达SthemA^M和EchemL基因的载体为穿梭质粒pECXK99E，所述野生型谷氨酸棒杆菌是谷氨酸棒杆菌ATCC13032。

2.权利要求1所述重组谷氨酸棒杆菌在发酵生产5-氨基乙酰丙酸中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：利用所述重组谷氨酸棒杆菌在无机盐培养基CGXII中发酵葡萄糖来生产5-氨基乙酰丙酸；其中，

所述无机盐培养基CGXII配方为：

20g/L(NH4)₂SO₄,5g/L尿素,1g/L KH₂PO₄,1g/L K₂HPO₄,0.25g/L MgSO₄﹒7H₂O,42g/L 3-吗啉丙磺酸,10mg/L CaCl₂,10mg/L FeSO₄﹒7H₂O,10mg/L MnSO₄﹒H₂O,1mg/L ZnSO₄﹒7H₂O,0.2mg/L CuSO₄,0.02mg/L NiCl₂﹒6H₂O,0.2mg/L biotin,40g/L葡萄糖,0.03mg/L柠檬酸钠，0.5mM IPTG，50μg/mL卡那霉素；

所述发酵葡萄糖的发酵条件为：

菌种接种量以体积百分比计为10±2％，发酵温度为30±1℃，pH为6.5～7.0，转速为180±20rpm，发酵时间为108±2h。