[发明专利]一种高效分离松茸菌种的方法

权利要求书

1.一种高效分离松茸菌种的方法，其特征在于，方法如下：

挑选松茸子实体时选择外观典型、大小适中、菌肉肥厚、颜色正常且尚未开伞的子实体，将松茸子实体用质量浓度75％酒精棉擦洗2-3次，放入已灭菌的超净工作台中；将松茸子实体沿菌盖与菌柄交界处掰开，再将菌盖表面表皮连同菌幕撕下，露出无菌的菌肉与菌褶部分；用无菌镊子夹住菌盖边缘，夹取1-2cm³大小的组织块，夹取的组织块既包括上层的菌肉又包括下层的菌褶部分；此时平板培养基温度在60℃左右，尚未凝固，用组织块的菌肉部分蘸取少量未凝固培养基，菌褶部分不与培养基接触，将组织块粘于培养皿盖内表面正中间，菌褶部分向下，组织块与培养基距离0.6cm；盖上盖封口保存，在25℃黑暗条件下正置培养，组织块的菌肉部分向菌褶供给营养，使菌褶成熟并喷洒孢子，成熟的孢子喷洒至培养基上萌发成纯菌丝体。

2.如权利要求1所述的一种高效分离松茸菌种的方法，其特征在于，所述的培养基配方为：

桑黄菌丝体6d发酵液200ml/L，马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，琼脂14g/L，维生素A1.5mg/L、维生素B₁2.5mg/L和维生素B₂2.5mg/L；

所述的桑黄菌丝体6d发酵液：在300mlPD液体培养基中接入桑黄斜面种，斜面种培养基为PDA，25℃避光培养7d，25℃振荡培养，160r/min，培养6d后，过滤得到发酵液；桑黄菌种来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏号：桑黄DL101CCTCCM2011137。