[发明专利]高效液相色谱法测定金霉素预混剂含量及相关物质的方法

权利要求书

1.高效液相色谱法测定金霉素预混剂含量及相关物质的方法，其特征在于，采用如下色谱条件：

色谱柱：(C18，5um)色谱柱；

流动相：以体积比为63～77:1.8～2.2:25～30的水、磷酸溶液、N,N-二甲基甲酰胺的混合溶液为流动相，所述磷酸溶液浓度为2mol/L；

流速：0.8～1.2ml/min；

检测波长：270～400nm;

柱温：30～40℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相中水、磷酸、N,N-二甲基甲酰胺的体积比为70：2：28。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流速为1mL/min，检测波长为365nm，柱温为35℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述相关物质包括四环素和差向金霉素。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：

（1）标品溶液配制：取金霉素标准品、四环素标准品、差向金霉素标准品用0.01mol/L盐酸稀释分别配制成标品溶液，过0.22μm滤膜，备供试标品溶液用；

（2）金霉素预混剂试样品溶液配制：取金霉素预混剂样品用0.01mol/L盐酸稀释配制成试样品溶液，过0.22μm滤膜，备供试样品溶液用；

（3）取相同体积的供试标品和样品溶液，注入高效液相色谱仪，按照权利要求1-3中任一项所述的条件进行高效液相色谱分析；

用峰面积外标法计算相关物质含量：

A_样：样品中相应组分的峰面积；A_标：相应标品的峰面积；C_标：相应标品溶液的浓度。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述金霉素标品溶液浓度为200μg/mL，所述四环素标品溶液浓度为16μg/mL，所述差向金霉素标品溶液浓度为12μg/mL，所述金霉素预混剂试样品溶液溶度为1～2mg/mL。