[发明专利]一种维生素B12的制备方法

权利要求书

1.一种维生素B12的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)水解

向VB12发酵液中加入与发酵液相同质量的水，加热至90～100℃进行水解，释放出细胞内的VB12，得到水解液；

(2)一次膜过滤

将步骤 (1)得到的水解液采用金属膜或陶瓷膜系统进行过滤，滤除蛋白、菌丝体等，当透过液滤出速度明显下降时，向膜系统中加入一定量的水继续过滤，当水解液中VB12含量低于5μg/L时，停止加水，过滤结束，收集一次膜透过液和一次膜浓缩液；

(3)二次膜过滤

将步骤(2)得到的一次膜透过液采用截留分子量为10000～80000的超滤膜系统进行过滤除杂，当透过液滤出速度明显下降时，向膜系统中加入一定量的水继续过滤，当水解液中VB12含量低于5μg/L时，停止加水，过滤结束，收集二次膜透过液和二次膜浓缩液；

(4)预涂转鼓脱蛋白

将步骤(3)得到的二次膜透过液采用立式预涂转鼓离心机脱除蛋白，预涂剂为硅藻土和珍珠岩，当蛋白积累至一定厚度被刮刀刮下，收集刮下的无助滤剂蛋白，当脱蛋白结束时，调节刮刀间距，刮下少量的有助滤剂蛋白并收集，同时收集转鼓滤液；

(5)蛋白吸附

将步骤(4)得到的转鼓滤液采用蛋白吸附树脂柱吸附其中的蛋白杂质，得到精制滤液，采用酸液或碱液或次氯酸钠对蛋白吸附树脂柱进行解吸，并收集蛋白；

(6)纳滤浓缩

将步骤(5)得到的精制滤液采用纳滤膜进行浓缩，得到大分子液和小分子液，其中，一部分小分子液送入步骤(2)一次膜过滤工序，剩余小分子液送入步骤(3)二次膜过滤工序；

(7)氰化钠转化

向步骤(6)得到的大分子液中加入适量氰化钠得到含氰精制滤液；

(8)三级吸附柱除杂结晶

将步骤(7)得到的含氰精制滤液进行三级吸附树脂柱除杂结晶，最终得到纯品氰钴胺(VB12)；

(9)将步骤(2)一次膜过滤工序收集到的一次膜浓缩液和步骤(3)二次膜过滤工序收集到的二次膜浓缩液混合后进行分离，分离出的清液送入步骤(1)水解工序，浓渣无助滤剂菌丝体与步骤(4)预涂转鼓脱蛋白工序得到的无助滤剂蛋白和步骤(5)蛋白吸附工序得到的蛋白一起收集，用于深加工；

(10)将步骤(4)预涂转鼓脱蛋白工序得到的无助滤剂蛋白进行焚烧处理。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在一次膜过滤工序，膜的过滤精度为30～200nm，过滤压力为0.35～0.45Mpa，温度为：30～70℃。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在二次膜过滤工序，过滤压力为0.5～0.9Mpa，温度为：30～70℃。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在预涂转鼓脱蛋白工序，立式预涂转鼓离心机的滤布过滤精度为400～1000目，预涂剂硅藻土和珍珠岩质量比为1:（1～100）。