[发明专利]一种新型群体感应抑制剂的分离提取、结构鉴定及其应用

权利要求书

1.一种式Ⅰ化合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(1)发酵生产：海洋污泥来源水莱茵海默氏菌QSI02的发酵培养：按培养微生物的常规方法，取水莱茵海默氏菌QSI02适量，所述水莱茵海默氏菌QSI02的保藏编号是CCTCCNO:M2015245，接种到LB液体培养基中，震荡培养12h，温度28℃、转速160rmp，所述LB液体培养基为：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCl 10g/L，去离子水1L，121℃，灭菌20分钟；

取上述培养12h的水莱茵海默氏菌QSI02接种到装有2.5L海水培养基的5L锥形瓶中，接种量为4％，震荡培养24h，温度28℃、转速160rmp，获得发酵培养物；所述海水培养基为：蛋白胨5g/L，酵母提取物2g/L，磷酸高铁0.1g/L，0.22μm微孔滤膜过滤的海水lL，121℃，灭菌20分钟；

(2)浸膏的获得：上述发酵培养物用大型离心机将菌体离掉，并收集发酵液；然后将发酵液真空低温浓缩至膏状，用甲醇从膏状发酵物中浸提，真空浓缩得到粗提物浸膏，-4℃保存备用；

(3)化合物的分离纯化：将上述获得的粗提物浸膏用甲醇溶解，再用0.22μm有机相滤膜过滤，采用紫外检测器UV-900与凝胶柱层析Sephadex LH20串联，以甲醇作为洗脱剂，根据254nm处紫外检测器检测结果洗脱分离为5个流份，对流份采用群体感应筛选模型进行活性检测，其中第4个活性洗脱流份再经过薄层层析制备，展开剂为水:正丁醇:乙酸乙酯＝1:3:1，分离纯化得到式Ⅰ化合物。

2.根据权利要求1所述制备方法制备的式Ⅰ化合物用于制备铜绿假单胞菌PA01群体感应活性抑制剂方面的用途，其特征在于该化合物在100μl和300μl时具有抑制铜绿假单胞菌PA01群集运动的活性。