[发明专利]一种从南极磷虾中提取及检测己二酸二辛酯的方法

权利要求书

1.一种从南极磷虾中提取己二酸二辛酯的方法，其特征是，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾为原料，采用乙醇为溶剂，在20～40℃、300～400W、20～40Hz的条件下超声提取，过滤提取液，得滤液；

（2）将滤液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

（3）利用柱层析对己二酸二辛脂的粗提物进行精制；

①制备硅胶层析柱；②将己二酸二辛脂的粗提物加入到硅胶床上；

③洗脱：洗脱剂为二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脱体积，收集900～1500mL的洗脱液，并对洗脱液进行浓缩、干燥，得到己二酸二辛脂。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（1）中，南极磷虾与乙醇的添加量比例为：1g:(5～10)mL。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（2）中，在20℃条件下将滤液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（3）中，所述二氯甲烷和甲醇体积比为8:1。

5.一种从南极磷虾中检测己二酸二辛酯的方法，其特征是，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾为原料，采用乙醇为溶剂，在20～40℃、300～400W、20～40Hz条件下超声提取，过滤提取液，得滤液；

（2）将滤液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

（3）利用柱层析对己二酸二辛脂的粗提物进行精制；

①制备硅胶层析柱；②将己二酸二辛脂的粗提物加入到硅胶床上；

③洗脱：洗脱剂为二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脱体积，分段收集洗脱液，收集若干次，并对洗脱液进行浓缩、干燥，得到若干份样品液；

（4）初步检测己二酸二辛脂：

取若干份样品液进行TLC初步检测，将若干份样品液点于高效薄层硅胶板上，以体积比为二氯甲烷：甲醇=3～4：1为展开剂，在展缸内展开，展距为8～10cm，展完后晾干展板，用茴香醛染色剂染色，然后置于100-105℃下烘烤6-10分钟，根据颜色，选择颜色变化为蓝紫色的样品液，即为己二酸二辛脂。

6.如权利要求5所述的方法，其特征是：步骤（3）中，控制洗脱体积，每250～300mL收集一次洗脱液，收集若干次，收集次数大于5次，并对洗脱液进行浓缩、干燥，得到若干份样品液。

7.如权利要求6所述的方法，其特征是：控制洗脱体积，每300mL收集一次洗脱液，收集5次，并对洗脱液进行浓缩、干燥，得到5份样品液。

8.如权利要求5所述的方法，其特征是：所述高效薄层硅胶板的型号为GF₂₅₄。

9.如权利要求5所述的方法，其特征是：还包括采用气相色谱-质谱进一步检测己二酸二辛脂，气相色谱-质谱检测条件：

①气相色谱柱型号：DB-1，长度:30m，内径:0.25mm，膜厚度:0.25μm，载气:He，流速：1mL/min；

②进样：进气温度:250℃，模式：分流，分流比：50:1，注射方式：手动；

③升温程序：初始温度50℃，以2℃/min升至60℃，再以30℃/min升至250℃，保持8min；

④进样量：0.2μL，溶剂:EA；

⑤电离方式：电子轰击源，四级杆温度150℃，离子源温度200℃；监测方式：全扫面，40-400amu单位；选择离子扫描模式；电离能量：70eV；溶剂延迟：2.06min；

得到样品质谱图，确定颜色变化为蓝紫色的样品液为己二酸二辛酯，并计算己二酸二辛酯的含量。