[发明专利]一种从南极磷虾中提取及检测己二酸二辛酯的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从南极磷虾中提取及检测己二酸二辛酯的方法。

背景技术

己二酸二辛酯(DOA)是一种聚氯乙烯的耐寒性增塑剂，其良好的耐寒功能使得南极磷虾可以适应南极寒冷的气候；DOA具有一定的耐热、耐光和耐水性，尤其它的毒性很低，对皮肤和眼睛的刺激小，可用于制造冷冻食品的包装薄膜、耐寒农用薄膜；此外DOA常用于塑料和橡胶制品加工和合成树脂的增塑剂，是重要的化工中间体。

目前，通常己二酸二辛酸是由化学合成方法进行合成制得，比如由己二酸和正辛醇在酸催化下直接酯化制得，目前多以浓硫酸和对甲苯磺酸为催化剂，这些化学方法合成己二酸二辛酸方法普遍存在以下缺陷：产品质量差、对设备腐蚀严重、副反应多、后处理复杂、对环境污染严重(产生各种废水、废渣)等问题。

因此，针对以上问题亟需探索一种清洁提取己二酸二辛酯的方法。

南极磷虾(学名Euphausiasuperba),是一种生活在南极洲水域的磷虾，体形似小虾，它们以微小的浮游植物作为食物，身长大约6厘米，重约2克，最长寿命可达6年。南极磷虾是海洋哺乳动物、鸟类和鱼类等南极生物主要的食物来源，是南极生态系统的关键物种。南极磷虾含有丰富的蛋白质；磷虾脂类所含的脂肪酸种类多，且多为不饱和脂肪酸；南极磷虾还含有丰富的矿物质元素，包括钙、磷、铁、锌、硒等。除此之外，磷虾还含有多种活性物质，如酶类、虾青素等。据统计，生活在南冰洋的南极洲水域的磷虾的数量可以达到2×10⁹吨，可能的捕获量估计在5×10⁶到7×10⁶吨。南极磷虾的寿命一般为5-7年，2龄以后即成熟，体长最大可达到60nm以上。南极磷虾有结群的习性，经常在200m左右的浅水层形成密集的群体。由于南极磷虾具有生物量大、分布广等特点，越来越多的研究者开始关注磷虾的开发利用价值。

目前并没有从南极磷虾中提取己二酸二辛酯的相关报道，更没有从南极磷虾中提取及检测己二酸二辛酯的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、准确、可靠的南极磷虾己二酸二辛酯的提取及检测方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

.一种从南极磷虾中提取己二酸二辛酯的方法，包括以下步骤：

(1)以南极磷虾为原料，采用乙醇为溶剂，在20～40℃、300～400W、20～40Hz的条件下超声提取，过滤提取液，得滤液；

(2)将滤液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

(3)利用柱层析对己二酸二辛脂的粗提物进行精制；

①制备硅胶层析柱；

②将己二酸二辛脂的粗提物加入到硅胶床上；

③洗脱：洗脱剂为二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脱体积，收集900～1500mL的洗脱液，并对洗脱液进行浓缩、干燥，得到己二酸二辛脂。

一种从南极磷虾中检测己二酸二辛酯的方法，包括以下步骤：

(1)以南极磷虾为原料，采用乙醇为溶剂，在20～40℃、300～400W、20～40Hz条件下超声提取，过滤提取液，得滤液；

(2)将滤液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

(3)利用柱层析对己二酸二辛脂的粗提物进行精制；

①制备硅胶层析柱；

②将己二酸二辛脂的粗提物加入到硅胶床上；

③洗脱：洗脱剂为二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脱体积，分段收集洗脱液，收集若干次，并对洗脱液进行浓缩、干燥，得到若干份样品液；

(4)初步检测己二酸二辛脂：

取若干份样品液进行TLC初步检测，将若干份样品液点于高效薄层硅胶板上，以体积比为二氯甲烷：甲醇＝3～4：1为展开剂，在展缸内展开，展距为8～10cm(优选为9cm)，展完后晾干展板，用茴香醛染色剂染色，然后置于100-105℃下烘烤6-10分钟，根据颜色，选择颜色变化为蓝紫色的样品液，即为己二酸二辛脂；

(5)采用气相色谱-质谱检进一步检测己二酸二辛脂：

气相色谱-质谱检测条件：

①气相色谱柱型号:DB-1，长度:30m，内径:0.25mm，膜厚度:0.25μm，载气:He，流速：1mL/min；

②进样：进气温度:250℃，模式：分流，分流比：50:1，注射方式：手动；

③升温程序：初始温度50℃，以2℃/min升至60℃，再以30℃/min升至250℃，保持8min；

④进样量：0.2μL，溶剂:EA；