[发明专利]简易、快速分离筛选好氧解油脂芽孢杆菌的方法

权利要求书

1.简易、快速分离筛选好氧解油脂芽孢杆菌的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）选择土壤、餐饮业下水道管壁泥样或活性污泥目标物接种于含有油脂的富集培养基中，5-37℃进行间歇增氧富集培养；

（2）移取富集培养物在75-80℃水浴杀除杂菌后，稀释涂布于含有BTB指示剂的油脂梯度平板上5-37℃培养2-7d；其中，含有BTB指示剂的油脂梯度平板的制备方法是先在培养皿中倒空白LB琼脂倾斜平板，待其凝固后倒入经充分混匀油脂的BTB琼脂培养基；

（3）对培养后的平板挑选高梯度区域呈黄色菌落，继续用划线法获得纯培养物，对纯培养物革兰氏染色镜检，以内生芽孢杆菌作为初筛菌株；

（4）对初筛菌株利用LB液体培养基纯培养；

（5）取纯培养菌液滴加到处于不同油脂浓度的油脂平板中的灭菌滤纸片上，以无菌水滤纸片为对照，测定透明圈 以求解其去除率，复筛出好氧解油脂能力强劲的芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述简易、快速分离筛选好氧解油脂芽孢杆菌的方法，其特征在于,所述的LB液体培养基配方如下：胰蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L,酵母膏10g/L，水1000ml；pH值为7.2；所述富集培养基为LB液体培养基中添加动物或植物油脂10-2000mg/L；所述BTB油脂琼脂培养基为富集培养基中添加0.06%BTB 1ml/L和琼脂15－20g/L；所述LB琼脂培养基为LB 液体培养基的基础上加入琼脂15－20g/L；所有培养基均需经过121℃，灭菌25-30min。