[发明专利]红细胞和非HDL过滤层及其制备方法、测量HDL用试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及了一种用于过滤红细胞和非高密度脂蛋白的综合过滤层及该过滤层的制备方法和使用该过滤层测量人体血液高密度脂蛋白用的干化学试纸条。

背景技术

胆固醇在血液中存在于脂蛋白中，其存在形式包括高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）、极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL）几种。在血中存在的胆固醇绝大多数都是和脂肪酸结合的胆固醇酯，仅有10%不到的胆固醇是以游离态存在的。高密度脂蛋白有助于清除细胞中的胆固醇，而低密度脂蛋白超标一般被认为是心血管疾病的前兆。

高密度脂蛋白：它运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，动脉造影证明高密度脂蛋白胆固醇含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。所以高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子。俗称“血管清道夫”。血清高密度脂蛋白胆固醇的降低，预示着冠心病的出现。临床上常同时测定高密度脂蛋白和血清总胆固醇，并根据它们的比值作为冠心病的信息指标。

测量全血中的高密度脂蛋白，通常需要两个处理步骤。首先，红细胞的存在会干扰比色测试，需要将全血中的红细胞分离出来，以产生血浆或血清；其次，由于通常采用的是相同的酶法比色来检测总胆固醇和高密度脂蛋白，因此，需要将总胆固醇中的非高密度脂蛋白如LDL、VLDL和乳糜颗粒除掉，以此排除对高密度脂蛋白测定的干扰。

在实验室内，将血液离心以从血浆中分离红细胞，并在试管通过溶液的比色法以测定分析物的浓度。但离心需要离心机，并耗费较长的离心时间。此法并不适用于需要现场测试的场所如社区诊所和患者在家庭中自己进行的测试。

另一种测量体液分析物如总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)和甘油三酯的方法，是采用干化学试纸条。此法操作便捷，检测快速，非常适用于床旁诊断（POCT）。干化学试纸条利用几个膜层来分离红细胞和血浆、使所述血浆与特定的一种或多种试剂反应并获得指示特定分析物浓度的信号，所述信号通常是分光光度信号。但目前的干化学试纸条存在测量误差，精密度不够，且测试分析时间长等不足之处。

发明内容

为了解决上述现有技术的不足，本发明提供了一种用于过滤红细胞和非高密度脂蛋白的综合过滤层，该过滤层在测量人体血液中高密度脂蛋白时将过滤红细胞和除去非HDL综合在一层中进行，减少了测量误差，提高了测量的重复性，并且响应时间更加快速。本发明还提供了一种该过滤层的制备方法和测量人体血液高密度脂蛋白用的干化学试纸条。

本发明所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：

红细胞和非高密度脂蛋白过滤层，其包含有用于过滤红细胞和非高密脂蛋白所需的试剂；该试剂由润湿剂、盐、非高密度脂蛋白沉淀剂按质量比1:0.5:1组成；其中，所述润湿剂为糖类，可以是单糖、二糖或多糖等；所述非高密度脂蛋白沉淀剂为磷钨酸、硫酸葡聚糖和二价金属的组合物；所述试剂还可包括血凝素。

在本发明中，所述血凝素为外源凝集素、小麦胚芽凝集素、阳离子聚合物中的任一种。

在本发明中，所述试剂均匀喷点在所述过滤层上，具体步骤如下：将润湿剂、盐和非高密度脂蛋白沉淀剂按照比例配置成水溶液，用HCl或NaOH调pH值至6.6-6.4。将过滤层放至传送带，所配溶液通过喷点机准确控制用量喷于过滤层上，喷点用量约为0.125μl/mm；将喷点后的膜材送入鼓风烘道中，温度为40~60度，湿度低于30%，烘干时间约为10min。所述过滤层为不对称膜材。所述不对称膜材为玻璃纤维、聚砜、聚醚砜的任一种。

一种测量人体血液高密度脂蛋白的干化学试纸条，由上支持层、下支持层组成，在上支持层的测试区开有至少一个加样孔，下支持层相应位置开有多个测试孔，所述加样孔和测试孔之间有上述的任一过滤层和反应层，所述反应层用于将反应层的试剂与通过过滤层后的无红细胞和非高密度脂蛋白的血液样品进行反应。

本发明具有如下有益效果：

用于过滤红细胞和非高密度脂蛋白的综合过滤层在测量人体血液中高密度脂蛋白时，将过滤红细胞和除去非HDL综合在一层中进行，减少了测量误差，提高了测量的重复性，并且响应时间更加快速，变异系数达到1.07%，响应时间低至3s。本发明还提供了一种测量人体血液高密度脂蛋白用的干化学试纸条。

附图说明

图1为本发明干式试纸条的结构示意图；

图2是现有技术中在一个层中进行过滤红细胞和低密度脂蛋白胆固醇两者的常规试纸条（上部曲线）和根据本发明的试纸条（下部曲线）在相同条件下所获得的反射率图。