[发明专利]用于扩增粉虱科昆虫线粒体COI基因的特异性引物有效
申请号: | 201510444405.9 | 申请日: | 2015-07-24 |
公开(公告)号: | CN104988150B | 公开(公告)日: | 2017-06-30 |
发明(设计)人: | 杜予州;汤小天;王吉锐;陆明星 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10 |
代理公司: | 南京知识律师事务所32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 扩增 粉虱科 昆虫 线粒体 coi 基因 特异性 引物 | ||
1.一对用于粉虱科昆虫线粒体COI基因序列扩增的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.一种粉虱科昆虫线粒体COI基因序列扩增方法,其特征是采用权利要求1所述的引物,用50μl PCR体系在特定PCR扩增条件下进行目标片段扩增。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的50μl PCR体系是:5μl含Mg2+的10×buffer,2.5μl 2.5mM的dNTP,3μl 10μM的上游引物,3μl 10μM的下游引物,0.5μl 5U/μl的rTaq酶,2μl 100ng的DNA模板,34μl双蒸水。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的特定的PCR扩增条件是:94℃预变性5分钟,94℃变性1分钟15秒,51℃退火温度1分钟15秒,72℃延伸1分钟5秒,共35个循环,最后72℃延伸10分钟。
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