[发明专利]IL-4检测引物、试剂盒和半定量检测方法

权利要求书

1.一种IL-4检测引物，其特征在于，包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的引物P1、具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的引物P2。

2.如权利要求1所述的IL-4检测引物，其特征在于，还包括具有序列表SEQ.ID.No.3碱基序列的竞争性引物P3。

3.一种IL-4检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述的IL-4检测引物。

4.如权利要求3所述的IL-4检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括具有序列表SEQ.ID.No.4碱基序列的引物P4、具有序列表SEQ.ID.No.5碱基序列的引物P5。

5.如权利要求3或4所述的IL-4检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括RNase抑制剂，且该RNase抑制剂为焦碳酸二乙酯。

6.如权利要求3或4所述的IL-4检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PMA和/或钙离子载体。

7.一种IL-4半定量检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

获取IL-4对照组细胞和IL-4待测组细胞；

提取所述IL-4对照组细胞的总RNA，并用具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的引物P1和具有序列表SEQ.ID.No.3碱基序列的竞争性引物P3进行RT-PCR，得到竞争模板；

提取所述IL-4待测组细胞的总RNA，并进行反转录获得待测cDNA模板；

将所述待测cDNA模板和竞争模板混合后，用具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的引物P1和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的引物P2进行PCR，得到靶序列扩增产物。

8.如权利要求8所述的IL-4半定量检测方法，其特征在于，将所述待测cDNA模板和竞争模板混合后，用具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的引物P1和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的引物P2进行PCR步骤之后，还包括：

将所述待测cDNA模板用具有序列表SEQ.ID.No.4碱基序列的引物P4和具有序列表SEQ.ID.No.5碱基序列的引物P5进行RCR，得到对照扩增产物。

9.如权利要求8所述的IL-4半定量检测方法，其特征在于，将所述待测cDNA模板用具有序列表SEQ.ID.No.4碱基序列的引物P4和具有序列表SEQ.ID.No.5碱基序列的引物P5进行RCR步骤之后，还包括：

根据靶序列扩增产物和对照扩增产物计算所述IL-4待测组细胞中IL-4的mRNA量。