[发明专利]一种pH值稳定的淋巴细胞无血清培养基及其制备方法和应用有效
申请号: | 201510448381.4 | 申请日: | 2015-07-27 |
公开(公告)号: | CN105039251B | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
发明(设计)人: | 李晓辉;刘强 | 申请(专利权)人: | 广州达晖生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/0781 | 分类号: | C12N5/0781;C12N5/0783 |
代理公司: | 佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙) 44387 | 代理人: | 颜春艳 |
地址: | 510000 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 ph 稳定 淋巴细胞 血清 培养基 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种pH值稳定的淋巴细胞无血清培养基,由基础培养基、转铁蛋白、亚硒酸钠、丙酮酸、脂质型牛血清蛋白、硫酸铜、偏钒酸铵、二氯化锰、硫酸锌、维生素E和其他成分组成,所述各成分的浓度分别为:所述转铁蛋白10mg/L;所述丙酮酸110mg/L;所述脂质型牛血清蛋白300mg/L;所述硫酸铜0.001mg/L;所述偏钒酸铵0.0005mg/L;所述二氯化锰0.00005mg/L;所述硫酸锌0.8mg/L;所述维生素E 2mg/L;所述基础培养基为1640培养基;其特征在于,所述其他成分组成为:乙醇胺、胰岛素、谷氨酰胺替代物、植物血球凝集素和pH缓冲系统;
所述亚硒酸钠0.01mg/L;所述乙醇胺1.5mg/L;所述胰岛素10mg/L;所述谷氨酰胺替代物10mg/L-30mg/L;所述植物血球凝集素100mg/L;所述pH缓冲系统10-50mM;
所述pH缓冲系统为甘油磷酸钠/PBS缓冲系统,所述甘油磷酸钠/PBS缓冲系统由质量体积浓度为2g/L的磷酸氢二钠,质量体积浓度为1g/L的磷酸二氢钾,质量体积浓度为9g/L的甘油磷酸钠组成;
所述谷氨酰胺替代物为丙氨酰谷氨酰胺和蛋氨酸脑啡肽的混合物,所述丙氨酰谷氨酰胺和所述蛋氨酸脑啡肽的浓度比例为1:1,所述丙氨酰谷氨酰胺的浓度为10mg/L,所述蛋氨酸脑啡肽的浓度为10mg/L。
2.一种制备权利要求1所述培养基的方法,其特征在于,按如下操作进行:取如权利要求1所述培养基的组分,加入超纯水中,使各组分充分溶解;加入超纯水定容,除菌。
3.权利要求1所述培养基在淋巴细胞培养中的应用。
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