[发明专利]用于测定中药及保健品中非法添加物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药及保健品质量检测体系，具体涉及用于测定中药及保健品中非法添加物质的方法。

背景技术

高血压和糖尿病是常见病、多发病，其发病率随着人民生活水平的提高、生活方式的改变及年龄结构的老龄化而迅速增加，已经严重威胁到人类健康。近年来，一些不法厂商在利益的驱动下，利用人们相信中药和保健品是纯天然无毒副产品，可以长期服用的心理，在中药制剂或保健食品中非法添加各种降压降糖化学药物，不仅严重影响了中药和保健食品声誉，而且危及消费者的身体健康。

现有的检测降糖降压药物的检测方法通常都是仅采用MRM的检测方法检测，得到定量的结果，避免不了假阳性结果的出现；而且如果需要定性检测的话，需要使用其它的高分辨质谱辅助二次检测。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种用于测定中药及保健品中非法添加物质的方法。

本发明采用的技术方案是：

用于测定中药及保健品中非法添加物质的方法，包括以下方法：

(1)采用有机溶剂提取方法对待测中药或保健品样品进行预处理；

(2)通过液相色谱-四级杆串联线性离子阱质谱法，采用多反应监测－信息依赖性采集－增强子离子扫描检测技术同时定性和定量检测经预处理后的中药及保健品中一种或多种非法添加物质。

根据本发明的一个优选的实施方式，所述非法添加物质为13种降糖或降压类化学药物，分别为：盐酸可乐定、阿替洛尔、硝苯地平、盐酸哌唑嗪、格列齐特、格列苯脲、格列吡嗪、甲苯磺丁脲、瑞格列奈、马来酸罗格列酮、盐酸吡格列酮、盐酸苯乙双胍和盐酸二甲双胍。

根据本发明的一个优选的实施方式，步骤(1)中样品预处理方法：将中药制品或保健品与乙腈混匀，超声提取，取出后放置到室温，加入乙腈定容，然后进滤膜过滤后，得到待测样品。

本发明样品通过乙腈提取，操作方法简单，直接进样检测，即可快速得到结果，不仅节省了样品前处理的时间，而且避免了样品在前处理过程中的损失，且样品的回收率较好。

其中，定容后，所述中药制品或保健品与乙腈的添加比例为：(0.2～0.5)g：(45～50)mL。经过大量实验验证，上述比例的待测物质的提取效果最好，比值较大的话，待测药物提取不完全。

所述中药制品或保健品若为固体，研成粉末状；若为液体，直接取样。

所述超声时间为15～30min，优选为20min，超声温度为20～35℃，优选室温。

所述滤膜的孔径为0.20～0.25μm，优选0.22μm。

超声波提取是利用超声波具有的机械效应，空化效应和热效应，通过增大介质分子的运动速度、增大介质的穿透力以提取生物有效成分。利用超声波技术来强化提取分离过程，可有效提高提取分离率，缩短提取时间、节约成本。上述超声条件经过实验验证使提取分离率最高。经过实验分析，所述滤膜的孔径为0.20～0.25μm，滤膜过滤除去杂质，以免影响检测结果的准确性。

根据本发明的一个优选的实施方式，步骤(2)中液相色谱-四级杆串联线性离子阱质谱法的色谱条件为：采用十八烷基键合硅胶柱(C18柱)，流动相由A相和B相组成，A相为体积分数为0.1％甲酸的水溶液，B相为乙腈，采用梯度洗脱。

优选的，所述C18柱的粒径1.7～2.5μm，柱内径为2.2～4.6mm，柱长为50～80mm，更优选为ZORBAX Eclipse XDB-C18，4.6mm×50mm，1.8μm；优选流速为0.2～0.4mL/min，更优选的为0.4mL/min；优选柱温32～37℃，更优选为35℃；进样量：5.00μL。

优选的，梯度洗脱程序：0～2min，B相保持10％；2～8min，B相从10％升至80％；8～10min，B相保持80％；10.1min-15min，B相降至10％；15min后停止。

根据本发明的一个优选的实施方式，步骤(2)中液相色谱-四级杆串联线性离子阱质谱法的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源(+ESI)，采用正离子模式检测；干燥气：N₂，碰撞气：高纯氮气；气帘气压力：35.0psi，喷撞气模式：Medium，离子化电压：5500V，雾化器温度：550℃，喷雾器压力：50.0psi，辅助气压力：50.0psi；采用多反应监测模式(MRM模式)。