[发明专利]毛钩藤的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物栽培领域，更具体地说，本发明涉及一种毛钩藤的快速繁殖方法。

背景技术

毛钩藤为茜草科、金鸡纳亚科钩藤属植物，别名倒吊风藤和台湾风藤，属藤本植物具攀援习性，嫩枝纤细，圆柱形或略具四棱角，被硬毛。毛钩藤是我国的特有种，主要分布在广东、广西、贵州、福建及中国台湾等地，生于山谷林下溪畔成灌丛中。钩藤属植物的根和带钩的茎枝中钩藤碱含量高，具有降血压、镇静、抗血小板聚集和抗血栓形成的作用，还有一定抗癌作用。毛钩藤多为野生资源，而人工栽培多是野外引种(其中包括种子播种，分株及扦插)，但其出芽率、成活率低，繁殖系数低，因此规模也小。随着市场需求量越来越大，现有的野生资源采集量逐渐增大而栽培资源同样跟不上采集需求。利用组织培养快繁技术，可以有效快速的增加其繁殖系数，不仅能满足市场对毛钩藤药材的需求，又有利于毛钩藤野生资源的保护。目前钩藤属中其他种的组织快繁已有报道，而以毛钩藤枝条作为繁殖材料的组织培养与快速繁殖尚未见报道。本发明通过建毛藤组织培养快速繁殖方法，具有繁殖率高、繁殖速率快等优点，便于在生产上大面积推广种植，满足了中药资源开发的迫切需要。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题和缺陷，并提供后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种毛钩藤的快速繁殖方法，首先利用针对毛钩藤的第一培养基和第二培养基培养毛钩藤的无菌外植体至生根，加快毛 钩藤苗的生根速率。

本发明还有一个目的是提供一种适用于毛钩藤苗的基质，保证毛钩藤苗减少虫害的侵蚀，提高毛钩藤的存活率。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种毛钩藤的快速繁殖方法，包括以下步骤：

步骤一、制作毛钩藤的无菌外植体；

步骤二、将所述无菌外植体转入第一培养基中进行光照培养，控制温度为24℃～26℃，诱导腋芽形成；所述第一培养基包括white培养基、1～1.3mg/L的竹醋液、35g/L的蜜二糖和4g/L的琼脂；

步骤三、将步骤二培养的带有腋芽的无菌外植体转入第二培养基中进行光照培养，控制温度为24℃～26℃，培养直至生根；其中，所述第二培养基包括固态培养基和液态培养基，所述第二培养基放置于培养盒中，使固态培养基在所述液态培养基的上方；

所述固态培养基包括white培养基、0.1～0.2mg/L的珍珠粉、0.1～0.5mg/L的激动素KT、0.7～0.8mg/L的吲哚丁酸、4g/L的琼脂和0.1～0.5g/L的活性炭；

所述液态培养基包括B5培养基、0.6～0.9mg/L的竹醋液和0.2～0.4mg/L的火龙果提取液；所述火龙果提取液的制作方法为将火龙果果皮破碎，用火龙果果皮质量10倍的50％的乙醇水溶液浸泡7小时，之后在55℃下萃取8小时，过滤，取滤液，将所述滤液真空减压浓缩至6mg/L，设置真空度为0.05～0.06MPa，减压浓缩时控制温度为55℃，即得所述火龙果提取液。

优选的是，在进行所述步骤三之前，还将所得的带腋芽的毛钩藤的无菌外植体进行脉冲电击处理：将带腋芽的毛钩藤的无菌外植体下方的1/3处浸泡于导电液中，控制电压为220v，脉冲频率为380mHz，进行电击处理3-5s；所述导电液为质量分数为25％的硝酸钾溶液。

优选的是，所述步骤三中，从无菌外植体的下方开始，将带有腋芽的无菌外植体的1/5浸没于所述液态培养基，将带有腋芽的无菌外植体的1/3置于所述固态培养基中。

优选的是，所述培养盒包括：

盒体，其为中空圆柱状；

隔板，其为圆形，所述隔板的直径略小于所述盒体的直径，所述隔板可拆卸的固定于所述盒体内，使所述盒体形成上部空间和下部空间，所述隔板平行于所述盒体的底部，所述隔板上间隔设置有2～4个使所述无菌外植体通过的第一通孔；

其中，所述盒体的底部设置有排水管，所述排水管上设有第一控制阀，所述盒体的下部空间的侧壁设置有进水管，所述进水管上设有第二控制阀，所述固态培养基设置于所述上部空间中，所述液态培养基置于所述下部空间中。

优选的是，还包括：步骤四、将生根的毛钩藤苗移栽至基质中培养，移栽后在所述基质表面铺设一层聚乙烯缓释膜，所述聚乙烯缓释膜中注入有质量配比为10∶1∶10∶2的硫酸亚铁、有机螯合肽、硼砂和七水硫酸锌；

所述基质从下到上由草灰层、细胞分裂剂层、鱼骨层和膨润土层按厚度比为4∶1∶2∶5构成。