[发明专利]一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂及其制备方法在审
申请号: | 201510458417.7 | 申请日: | 2015-07-30 |
公开(公告)号: | CN106689211A | 公开(公告)日: | 2017-05-24 |
发明(设计)人: | 闫龙翔;陈露;王学娟 | 申请(专利权)人: | 上海绿乐生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N63/00 | 分类号: | A01N63/00;A01N63/04;C12N1/20;C12N1/14;A01P1/00;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/465;C12R1/885;C12R1/125 |
代理公司: | 上海骁象知识产权代理有限公司31315 | 代理人: | 赵俊寅 |
地址: | 201108 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 含有 哈茨木霉 生防性 复合 微生物 及其 制备 方法 | ||
1.一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂,包括载体和复合微生物菌,其特征是:所述的载体是氨基酸生产过程中产生的pH为5.5-8.5的水解渣,所述的复合微生物菌包含有生防性枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HL259、生防性链霉菌(Streptomyces sp.)YL04和生防菌哈茨木霉(Trichoderma harzianum)T4上述三种生防菌的单独发酵液分别与载体按照按质量比为0.3-1:2-7进行吸附后所得的粉末再分别按照质量比为3-4:3-3.5:2.5-3.5均匀混合,均匀混合后的粉末内复合微生物菌的活菌数量为5.8-6.7×108个/克,水分保持在30%以内。
2.如权利要求1所述的一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂,其特征是:所述的含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂的细度为60-80目。
3.如权利要求1所述的一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂,其特征是:所述的三种生防菌的单独发酵液分别与载体按照按质量比为1:10的比例进行吸附,吸附后的三种固体粉状菌剂按照质量比为3:3.5:3.5的比例混合均匀,复合菌剂的有效活菌数量达5.8×108个/克以上,水分保持在20%左右。
4.如权利要求1所述的一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂,其特征是:所述的三种生防菌的单独发酵液分别与载体按照按质量比为1:7的比例进行吸附,吸附后的三种固体粉状菌剂按照质量比为4:3:3混合均匀,所述的复合菌剂的有效活菌数量达6.0×108个/克以上,水分≈24%。
5.如权利要求1所述的一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂,其特征是:所述的三种生防菌的单独发酵液分别与载体按照按质量比为1:6的比例进行吸附,吸附后的三种固体粉状菌剂按照质量比为4:3.5:2.5混合均匀,所 述的复合菌剂的有效活菌数量达6.2×108个/克以上,水分≈26%。
6.如权利要求1所述的一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂,其特征是:所述的三种生防菌的单独发酵液分别与载体按照按质量比为1:4的比例进行吸附,吸附后的三种固体粉状菌剂按照质量比为3.5:3.5:3混合均匀,所述的复合菌剂的有效活菌数量达6.7×108个/克以上,水分保持在30%以内。
7.一种制备权利要求1-6中所述的含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂的方法,其特征是:包括如下步骤:
S1:制备水解渣,将水解渣敲碎成粉末或小颗粒,再与粉状石灰混合按照质量比为4:1混合均匀,再将混合均匀的粉末粉碎后堆放8-12小时,让其充分反应,最后调节其pH达到5.5-8.5;
S2:制备发酵液,将生防性枯草芽孢杆菌HL259,生防性链霉菌YL04,生防菌哈茨木霉T4的三种菌种分别转入种子罐、发酵罐进行单独发酵,得到三种菌的发酵液;
S3:将S2中单独发酵后的菌液与S1中制备的水解渣按质量比为0.3-1:2-7的量进行吸附,吸附后的三种固体粉状菌剂按照质量比为3-4:3-3.5:2.5-3.5的比例混合均匀;
S4:粉碎,将S2中混合均匀的粉状菌剂粉碎,使其达到60-80目,且复合菌剂的有效活菌数量达5.8~6.7×108个/克以上,水分保持在30%以内,即得到成品复合微生物菌剂。
8.一种制备权利要求7,S2中枯草芽孢杆菌HL259发酵液的方法,其特征是:包括以下步骤:
S1:在发酵培养基中,以1-2%接种量至种子罐;所述培养基由以下组分按质量比:豆饼粉5~5.6%,玉米粉6.5~7.2%,Na2HPO4 0.5~0.8%,(NH4)2SO4 0.2~0.4%,NH4Cl 0.10~0.13%,CaCl2 0.10~0.13%构成;
S2:在种子罐内发酵液以3-5%接种量接种到发酵罐;
S3:所述的种子罐和发酵罐的在28±1℃的温度内培养24-48h,其通气量为1:0.5-1:1.6,并加入消沫剂,以200-400rpm的速度进行搅拌。
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