[发明专利]一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于植物病害防治领域，具体涉及一种含有哈茨木霉的含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

我国植物病害生物防治研究经过多年的发展，在国家主管部门的扶持下，发展步伐逐年加快，在特异微生物选育技术、菌株遗传改造、生防农药作用机理以及代谢调控机理等方面取得了一定的研究进展。通过建立新的筛选体系，获得了一批高效的生防微生物资源。

生防菌木霉已广泛应用于防治蔬菜根腐病等土传病害，木霉除了已明确的重寄生、竞争、抗性作用生防机理外，还发现木霉可定殖在植物根系组织内，与植物形成共生体，在互作区产生生物活性分子，诱导植物发生局部的系统抗病性。还能诱导植物蛋白质组变化，促进作物营养吸收和生长，提高作物产量。

枯草芽孢杆菌通过定植在植物根际、体表或体内，同病原菌竞争植物周围的营养、分泌抗菌物质抑制病原菌生长，同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，从而达到生防的目的。枯草芽孢杆菌对稻瘟病菌Magnaporthe grisea、芋疫病菌Phytophthora colocasia、西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.niveum、辣椒枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum、瓜果腐霉Pythium aphaniderm atum等病原菌具有较强的抑制作用。

放线菌产生的抗生素在植物病害生物防治方面发挥着重要作用。由放线菌 制成的活细胞制剂，具有无毒、无残留、不伤害非靶标微生物、与环境兼容性好、防病持效期长等优点。生防链霉菌可产多种抗生素、胞外酶等活性物质，且孢子抗逆性强，在土传病害防治方面具有较好的应用前景。

尽管枯草芽孢杆菌、生防性链霉菌和生防菌木霉作为生物杀菌剂在植物病害的生物防治中取得了一些成效，但还是存在不少问题。

首先，作为生物杀菌剂，上述菌种在田间效果表现不稳定，经发明人研究发现可能是由于菌株在室内传代培养，与野生菌株活性有所差异。并且室内盆栽试验与不同地区田间环境不同，造成盆栽试验结果与田间应用效果有较大差异。其次，微生物菌剂也可能引起病原菌抗性。最后，微生物菌剂的防治成本一般高于化学药剂。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种能够防治多种土传病害且效果稳定、能够适应不同环境的含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂及其制备方法。

为实现上述目的，本发明提供了一种含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂，包括载体和复合微生物菌，所述的复合微生物菌包含有枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HL259、生防性链霉菌(Streptomyces sp.)YL04和生防菌哈茨木霉(Trichoderma harzianum)T4，上述三种生防菌的单独发酵液分别与载体按照按质量比为0.3-1：2-7进行吸附后所得的粉末再分别按照质量比为3-4：3-3.5：2.5-3.5均匀混合，均匀混合后的粉末内复合微生物菌的活菌数量为5.8-6.7×10⁸个/克，水分保持在30％以内。

进一步，所述的载体是氨基酸生产过程中产生的水解渣，所述的水解渣pH 范围为5.5-8.5。

进一步，所述的含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂的细度为60-80目。

本发明还提供了上述含有哈茨木霉的生防性复合微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

S1：制备水解渣，将水解渣敲碎成粉末或小颗粒，再与粉状石灰混合按照质量比为4：1混合均匀，再将混合均匀的粉末粉碎后堆放8-12小时，让其充分反应，最后调节其pH达到5.5-8.5；

S2：制备发酵液，将生防性枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HL259，生防性链霉菌(Streptomyces sp.)YL04，生防菌哈茨木霉(Trichoderma harzianum)T4的三种菌种分别转入单独的种子罐、发酵罐进行单独发酵，得到三种菌的发酵液；

S3：将S2中单独发酵后的菌液与S1中制备的水解渣按质量比为0.3-1：2-7的量进行吸附，吸附后的三种固体粉状菌剂按照质量比为3-4：3-3.5：2.5-3.5的比例混合均匀。

S4：粉碎，将S2中混合均匀的粉状菌剂粉碎，使其达到60-80目，且复合菌剂的有效活菌数量达5.8～6.7×10⁸个/克以上，水分保持在30％以内，即得到成品复合微生物菌剂。

进一步，S1中是通过加入石灰调节pH值。