[发明专利]铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法

权利要求书

1.铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)原球茎的繁殖：选择优良铁皮石斛植株的顶芽或腋芽为外植体，外植体消毒后在MS+6-BA2.0mg/L+KT0.5mg/L+IAA0.25mg/L+NAA0.5mg/L+矮壮素0.1mg/L；或MS+6-BA1.5mg/L+KT0.5mg/L+IAA0.3mg/L+NAA0.4mg/L+矮壮素0.3mg/L琼脂固体培养基上，诱导原球茎的同时分化出健壮芽；

(2)一步成苗批量化生产：将步骤(1)获得的带芽原球茎直接转入MS+6-BA0.3mg/L+IAA0.3mg/L+NAA0.4mg/L+矮壮素0.6mg/L；或者MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.2mg/L+NAA0.6mg/L+矮壮素0.9mg/L的琼脂固体培养基上进行增殖、分化、壮苗和生根；

(3)试管苗移栽。

2.根据权利要求1所述的铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)中将外植体剪成0.5-1cm长含有1节1芽的规格。

3.根据权利要求1或2所述的铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，外植体消毒过程：首先用洗衣粉清洗干净，在无菌操作台上用无菌水洗5～7次，用70％酒精浸润30秒～1分钟，再放入0.1％的升汞溶液中灭菌8～15分钟，无菌水冲洗5～6次，备用。

4.根据权利要求1所述的铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)诱导出的原球茎继续继代培养，每隔40～50d继代一次。

5.根据权利要求1所述的铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(2)培养时每隔35～45d出苗一次。

6.根据权利要求1所述的铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)和(2)的培养温度为24℃±2℃，1000～2000lx环境中，每天10～12小时光照培养。

7.根据权利要求1所述的铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(3)试管苗移栽具体过程：试管苗出瓶移栽前，将根叶俱全的瓶苗，放置室外炼苗5-7d，随后取出清洗根部培养基，将幼苗移栽至栽培基质中，栽培基质中质量比例苔藓：树皮:小石块＝5:3:1，在温度为20～28℃，空气湿度80～90％的条件下生长，30～40d长出新叶时，即已成活。