[发明专利]一种生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法在审
申请号: | 201510475366.9 | 申请日: | 2015-08-05 |
公开(公告)号: | CN105061599A | 公开(公告)日: | 2015-11-18 |
发明(设计)人: | 徐志伟;张传明;袁金城 | 申请(专利权)人: | 海奥斯生物科技镇江有限公司 |
主分类号: | C07K16/38 | 分类号: | C07K16/38;C07K16/06 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 许丹丹 |
地址: | 212446 江苏省镇*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 羊抗人胱抑素 蛋白 血清 方法 | ||
1.一种生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)抗原准备:选用人胱抑素C蛋白抗原、用无菌PBS和弗氏佐剂制成免疫原乳剂,备用;
(2)第一次注射:使用上述免疫原乳剂对羊进行注射,注射部位为左右足底2点、左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,总共12个注射点,平均注射;
(3)第二次注射:第一次注射后15天进行第二次注射,注射部位为左右腹股沟淋巴结内2点、左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,共计12个注射点,平均注射;
(4)第三次注射:第二次注射后9-11天进行第三次注射,注射部位为左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,共计10个注射点,平均注射;
(5)第四次注射:第三次注射后9-11天进行第四次注射,注射部位为左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,共计10个注射点,平均注射;
(6)第五次注射:第四次注射后9-11天进行第五次注射,注射部位为左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,共计10个注射点,平均注射;
(7)第六次注射:第五次注射后9-11天进行第六次注射,注射部位为左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,共计10个注射点,平均注射;
(8)第七次注射:第六次注射后9-11天进行第七次注射,注射部位为左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,共计10个注射点,平均注射;
(9)第八次注射:第七次注射后9-11天进行第八次注射,注射部位为左右腹股沟皮下4点、颈部两侧皮下2点、背部皮下4点,共计10个注射点,平均注射;
(10)取血清:第八次注射五天后对免疫的羊静脉采血,血液放入38.5℃水箱中1小时,待血清充分析出,经离心沉淀分离出抗血清,放至2~8℃冰箱保存;
(11)血清效价检测:取上述抗血清,检测效价。
2.根据权利要求1所述的生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,所述第一次注射前乳化用的弗氏佐剂为完全弗氏佐剂。
3.根据权利要求1所述的生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,所述第二次、第三次、第四次、第五次、第六次、第七次和第八次注射前乳化用的弗氏佐剂为不完全弗氏佐剂。
4.根据权利要求1所述的生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,所述第一次注射的剂量为每只羊0.25mg人胱抑素C蛋白抗原。
5.根据权利要求1所述的生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,所述第二次注射的剂量为每只羊0.5mg人胱抑素C蛋白抗原。
6.根据权利要求1所述的生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,所述第三次、第四次、第五次、第六次、第七次和第八次注射的剂量为每只羊1mg人胱抑素C蛋白抗原。
7.根据权利要求1所述的生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,所述血清效价检测的方法为双扩免疫法。
8.根据权利要求1所述的生产羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法,其特征在于,所述羊为土山羊。
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