[发明专利]羊布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条

权利要求书

1.一种羊布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条，其特征在于该试剂条主要含有：以制备的光滑型布鲁氏菌S2株的脂多糖(LPS)作为测试线包被抗原(检测带)，以鼠抗牛IgGFc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫(流动带)，以羊抗鼠IgG抗体作为检测试纸条的质控抗原(质控带)，同时含有试纸条样品吸收垫(样品垫)、玻璃纤维素膜(胶体金垫)、吸水纸。将喷有检测线、质控线的硝酸纤维素膜上端贴上吸水垫，下端贴上金标垫及样品吸收垫，以上各组分首尾相连，完整衔接。其中：

(1)该胶体金试纸条中使用猪种布鲁氏菌(S2株)提取的LPS作为测试线包被抗原，S2对猪、牛、羊布鲁氏菌病均具有良好的敏感性，以S2制备的LPS提高了试纸条检测的敏感性；

(2)本发明改进了传统LPS纯化和纯度测定的方法，提高了本发明中试纸条的特异性，不仅能有效排除常规革兰氏阴性细菌对布鲁氏菌的干扰，而且能排除一般布病血清学诊断方法无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157干扰的技术缺陷，提高了检测的特异性。

(3)本发明利用鼠抗羊IgGFc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫，进一步提高了检测的特异性。

2.权利要求1所述牛布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条，其特征在于LPS抗原的纯度测定方法是：

将商品化LPS标准品稀释成1mg/ml、100μg/ml、10μg/ml、1μg/ml、100ng/ml、10ng/ml等不同稀释度；同时根据称重结果将LPS配制成1mg/ml的初始浓度，并稀释成100μg/ml的浓度；将上述各稀释度的LPS溶液取100μl/样品加入96孔酶标板上，在529nm波长下读取吸光度；建立LPS标准品各稀释度的OD529值，并建立浓度与吸光度之间的标准曲线；根据标准曲线以及布鲁氏菌LPS吸光度，计算LPS的浓度。LPS纯度为：LPS浓度×单位体积/单位质量。

3.权利要求1中所述羊布鲁氏菌胶体金试纸条的应用，其特征在于对布鲁氏菌检测不需要复杂的检测仪器，能在采血现场进行检测，特别适合羊场养殖人员和基层兽医使用。