[发明专利]促黄体生成素的半定量检测系统及其检测方法

权利要求书

1.一种促黄体生成素的半定量检测系统，其特征在于：所述系统由促黄体生成素的胶体金免疫层析试条阅读仪和促黄体生成素规则分子与总分子的金标试条组成，所述胶体金免疫层析试条阅读仪能够对促黄体生成素规则分子与总分子的金标试条上的检测线颜色深浅进行半定量检测，并将一段时间内每次测试的结果，在检测仪的LCD显示器上将这些结果绘制成一种曲线，提示促黄体生成素排卵期和峰值期，准确判断排卵的时间，所述促黄体生成素的胶体金免疫层析试条阅读仪包括电源开关（2）、单片机（3）、电机（4）、发光二极管（5）、光电传感器（6）、功率放大器（7）、A/D转换器（8）、LCD显示器（9）、存储器（11）、按键（10），所述促黄体生成素规则分子与总分子的金标试条包括塑料基片（1-1），所述塑料基片（1-1）上设有上样垫（1-2）和吸水垫（1-3），所述上样垫（1-2）和所述吸水垫（1-3）上均设有保护膜（1-4），所述上样垫（1-2）和所述吸水垫（1-3）之间下方设有硝酸纤维素膜（1-5），所述上样垫（1-2）的连接端设有固相化胶体金（1-6），所述固相化胶体金（1-6）的一端与所述硝酸纤维素膜（1-5）的一端搭接在一起，所述硝酸纤维素膜（1-5）上依次包被有第二检测线（T₂）、第一检测线（T₁）和质控线（C）；

所述促黄体生成素规则分子与总分子的金标试条的制备方法，包括以下步骤：

A、硝酸纤维素膜的制备：

a、选择3μm～10μm孔径的硝酸纤维素膜，根据需要将膜分切成宽度为大于等于2.0cm,长度为30.5cm的规格备用；

b、用0.1MTris-HCl缓冲液配制供第二检测线包被使用的抗α-LH抗体2.0mg/ml、供第一检测线包被使用的 LH总分子抗体1.5mg/ml及供质控线包被使用的抗鼠IgG抗体1.0mg/ml；

c、选择硝酸纤维素膜的抗体包被面并作标记，将需包被的第一检测线、第二检测线和质控线平行均匀的包被在膜片上，且第一检测线与第二检测线距离0.4cm、第二检测线与质控线的间距控制在距离0.8cm，硝酸纤维素膜在2℃～30℃的恒温条件下干燥备用；

d、配置封闭处理浸泡液，向配液罐加入纯化水；按照0.1M磷酸盐缓冲液、0.5%糖分、1%封闭蛋白、0.05％防腐剂的配比用电子分析天平称量相应物质，直接加入到配液罐中搅拌，搅拌直至完全溶解，加纯化水定容至所需体积，充分搅拌均匀，搅拌时间不少于10分钟，备用，所述糖分为蔗糖或海藻糖，所述封闭蛋白为络蛋白或牛血清白蛋白，所述防腐剂为NaN₃或硫柳汞；

e、将硝酸纤维素膜用0.01M磷酸盐缓冲液浸泡洗涤后，浸泡于封闭处理液中30min，取出晾干备用；

B、胶体金吸附垫的标记及固相：

a、胶体金复溶液的配制：向配液罐加入纯化水；按照5%海藻糖、2%牛血清白蛋白、0.5%柠檬酸三钠、0.05%聚乙二醇、0.05％NaN₃的配比用电子分析天平称量相应物质，直接加入到配液罐中搅拌，搅拌直至完全溶解，加纯化水定容至所需体积，充分搅拌均匀，搅拌时间不少于30分钟，备用；

b、用量筒量取需要标记量的胶体金，按pH6.5-7.0进行调节，即加入0.4% 0.2mol/L的碳酸钾溶液，于磁力搅拌器上搅拌15分钟后，取LH-β单克隆抗体加入胶体金中，于磁力搅拌器上搅拌30分钟后加入0.5‰稳定剂后搅拌30分钟后离心，收集沉淀，用胶体金复溶液按3%复溶，于磁力搅拌器上搅拌至混合均匀，备用；

c、取上述3%复溶的胶体金标记抗体，用胶体金复溶液按4%复溶，于磁力搅拌器上混合均匀；将混合均匀的胶体金标记抗体溶液用喷金机按照3.5μl/cm的线浓度喷于胶体金吸附垫上，置于干燥室晾干≥4个小时，干燥室控制温度18-28℃，相对湿度≤40%，保证空气畅通且气流不能直接吹于胶体金吸附垫上，将干燥好的胶体金吸附垫放入到装有干燥剂的铝箔袋中，密封保存，备用；

C、组装及裁切。