[发明专利]一步放大法荧光检测汞离子的方法有效
申请号: | 201510486405.5 | 申请日: | 2015-08-10 |
公开(公告)号: | CN105044067B | 公开(公告)日: | 2018-05-01 |
发明(设计)人: | 王玉;黄加栋;许颖;刘素;王虹智;郭玉娜;崔洁;邱婷婷;崔雪君;裴倩倩;冷雪琪;韩聪 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所37218 | 代理人: | 张世静 |
地址: | 250022 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一步 大法 荧光 检测 离子 方法 | ||
1.一步放大法荧光检测汞离子的方法,其特征在于,是通过以下步骤得到的:
(1)在200μl离心管中依次放入8μl H2O;0.5μM,2μl Probe1链;0.5μM,2μl Probe2链;10μM,5μl HAP链;Nt.BbvCI的bμffer 2μl;Nt.BbvCI酶100U/ml 1μl,制成20μl均相体系;在振荡器上振荡30s,混合均匀;
(2)然后将混匀的混合液放入37℃的恒温箱中孵育2h;
(3)向混合液中加入180μlH2O溶液,混合均匀,形成200μl体系,将其全部置入荧光杯中,放入荧光仪;
(4)设置激发波长为494nm,发射波长范围为500nm-630nm,入射狭缝5nm,出射狭缝宽度为3nm;开始测试其荧光强度;
所述的HAP的3’端修饰FAM发光基团,5’端修饰Dabcyl猝灭基团;
所述的Probe1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;
所述的Probe2的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;
所述的HAP的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
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