[发明专利]一种抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺

说明书

技术领域

本发明属于农副产品精深加工的技术领域，特别涉及一种抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺。

背景技术

草菇是世界上重要的栽培食用菌，其总产量在世界四大栽培食用菌中居第三位，我国草菇年产量3万多吨，占全世界总产量的70％～80％，居世界之首。草菇是食用菌中最不易保鲜贮藏的菇类，采后的后熟作用非常强烈，且采收期的气温较高，又不能在较低温度下贮藏，这些因素制约了新鲜草菇的流通和大规模生产。

人体内的自由基会引起生物细胞氧化性损伤，进而诱发癌症、衰老、心血管疾病等慢性病。鉴于传统合成的抗氧化剂(BHT、BHA)存在毒性和不安全性，而在人们长期食用的食品中，天然抗氧化剂成分的毒性远远低于人工合成的抗氧化剂，因此，近年来从自然界寻求天然抗氧化剂的研究日益受到重视。

对草菇中的抗氧化活性成分已有一些报道。李乐等研究证明草菇的甲醇和水的粗提物具有自由基清除和抑制大鼠红细胞溶血的作用。孙延芳等采用微波辅助提取对草菇的多酚含量及抗氧化活性进行研究，结果表明草菇多酚均具有很强的抗氧化能力。Cheung等采用3种不同方法测定了草菇的甲醇提取物和水提取物的抗氧化活性，发现水提取物中总酚含量高于甲醇提取物，其抗氧化活性也高于甲醇提取物。赵俊霞等用不同有机溶剂对草菇培养液及菌丝体中的代谢成分进行分离提取，代谢提取物均有较高的DPPH·清除率，即较高的抗氧化活性，其有效成分含有粗三萜和黄酮类物质。多糖是食用菌中重要的药理成分之一。近年研究表明，多糖除了具有抗衰老、抗病毒、抗癌、免疫调节等功能作用外，还具有抗氧化作用。草菇多糖抗氧化活性的研究目前还未见报道。

抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺，加强草菇开发出系列的深加工产品，改变单一的产品结构，延伸产业链，满足不同的消费群体，扩大市场的需求。

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供了一种抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺。

技术方案：本发明提供的一种抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺，该工艺包括草菇预处理、粉碎、酶法提取及酶灭活、离心、超滤法分离、浓缩、干燥得到抗氧化草菇多糖，其中，通过采用纤维素酶提取和多次超滤分离获得了多糖样品液。

一种抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺，该工艺包括以下步骤：

1)草菇预处理：通过干制得到烘干后的草菇，然后进行脱脂得到脱脂草菇；

2)粉碎：将步骤1)中脱脂草菇粉碎得到草菇粉粒，粉碎粒度40-80目；

3)酶法提取及酶灭活：通过在草菇粉粒中加入纤维素酶酶解后再升温灭活得到物料；

4)离心：将步骤3)中物料降温至20-40℃，离心，转速为3000-4000r/min，离心时间5-10min，弃沉淀，取清液备用；

5)超滤法分离：通过超滤分离方法得到截流液为分子量大于100KD和分子量为5-10KD的多糖样品液；

6)浓缩：在步骤5)所述的截流液中分别缓缓加入95％乙醇，加入乙醇过程中不断搅拌，混合液中乙醇质量浓度控制在70％-80％，静置沉淀6-24小时后，虹吸上清液至原体积1/5-1/10，下部液体进行离心分离，转速为3500-4000r/min，离心时间10-15min；

7)干燥：在步骤6)所述的沉淀，50-70℃烘箱或真空干燥箱烘干，粉碎；或冷冻干燥机冻干，含水量低于4％，即得草菇多糖。

其中，上述步骤3)酶法提取及酶灭活具体步骤为：草菇粉粒中加入20-30倍草菇重量的水，然后加入0.3％-0.35％纤维素酶，料温保持50℃-55℃，搅拌，维持温度90-120min后，将物料升温至90-100℃，维持5-10min灭活后将得到的物料备用。纤维素酶法提取草菇多糖对·OH和DPPH·有较强的清除作用及还原能力，均高于热水提取法提取的草菇多糖。

其中，上述步骤5)超滤法分离具体步骤为：将截留分子量为5KD的膜组件组装于超滤设备，在25℃，入口压力2～5kg/m²，出入口压差不要超过1.5kg/m²，截流液得到分子量大于5KD的多糖样品液；透过液得到分子量小于5KD的多糖溶液，将分子量大于5KD的多糖溶液经截留分子量为10KD的超滤膜处理，透过液为分子量5-10KD的多糖样品液；截流液得到分子量大于10KD的多糖溶液，将分子量大于10KD的多糖溶液经截留分子量为100KD的超滤膜处理，截流液为分子量大于100KD的多糖样品液。