[发明专利]一种延缓蔬果成熟的微生物菌剂及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种微生物菌剂用于延缓蔬果成熟的用途，其特征在于，所述的微生物菌剂采用如下方法制备：

1）基础培养：将从中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC）采购的以下菌种：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），编号：1.4255 ；Xanthophyllomyces dendrorhous，编号：2.1557；紫红曲霉(Monascus purpureus)，编号：3.5839；西洼湖戈登氏菌（Gordonia sihwensis）编号： 4.2184；酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编号：2.3973；瘦果红酵母（Rhodotorula acheniorum）编号：2.4248接种至各自的基础培养基中，在30℃摇床上培养1-4天；

2）诱导培养：分别制备各细菌相应的诱导培养基-I，是在各细菌原有的基础培养基的成分里加入以下几种物质：0.1-100 mM Zn²⁺, 0.1-100 mM Ni²⁺，5-280mM维生素C，2-35mM维生素E，0.006-0.7mM乙酰胆碱和0.005-0.45mM n-乙酰氨基葡萄糖；将步骤1）培养的各细菌离心收集并分别转入相应的诱导培养基-I中，在30℃摇床培养3-5天；

分别制备各细菌的诱导培养基-II，是在各细菌原有的基础培养基的成分里加入以下几种物质：0.1-100 mM Fe²⁺或 Fe³⁺, 1-100 mM Ca²⁺,1-100 mM Mg²⁺和0.05-1mM 羟基脲；将经上述诱导培养基-I培养的各种细菌离心收集并分别转入相应的诱导培养基-II中，在30℃摇床培养5天以上；

3）分别离心收集经步骤2）培养的各种菌体细胞，取枯草芽孢杆菌和瘦果红酵母混合，或者取Xanthophyllomyces dendrorhous、紫红曲霉、西洼湖戈登氏菌、酿酒酵母中的几种与枯草芽孢杆菌和瘦果红酵母混合，获得微生物菌剂；

所述的微生物菌剂以非直接接触的方式用于延缓蔬果成熟。

2. 如权利要求1所述的微生物菌剂用于延缓蔬果成熟的用途，其特征在于，将各细菌在基础培养基、诱导培养基-I或诱导培养基-II中培养时，均培养至使枯草芽孢杆菌，西洼湖戈登氏菌和瘦果红酵母各自的菌液终浓度达到10⁸ CFU/mL以上,Xanthophyllomyces dendrorhous和酿酒酵母各自的菌液终浓度都达到10⁷CFU/mL以上，紫红曲霉的菌液浓度在分光光度计600纳米处的吸光值达到2.5以上。

3. 如权利要求1所述的微生物菌剂用于延缓蔬果成熟的用途，其特征在于，步骤3）为取步骤2）诱导培养后的瘦果红酵母、枯草芽孢杆菌、Xanthophyllomyces dendrorhous、紫红曲霉、西洼湖戈登氏菌和酿酒酵母按质量比1:1:（0-5）:（0-10）:（0-10）:（0-10）混合的混合物作为微生物菌剂。

4.如权利要求1所述的微生物菌剂用于延缓蔬果成熟的用途，其特征在于，所述的维生素E为维生素E307。

5.如权利要求1所述的微生物菌剂用于延缓蔬果成熟的用途，其特征在于，所述的离心采用8000g的转速。

6. 如权利要求1所述的微生物菌剂用于延缓蔬果成熟的用途，其特征在于，培养摇床的转速为10-300 rpm。