[发明专利]一种延缓蔬果成熟的微生物菌剂及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种用于延缓蔬果成熟的微生物菌剂及其制备方法，主要是利用枯草芽孢杆菌，红球菌属，红曲霉菌，戈登氏菌属，酵母菌及瘦果红酵母菌来制备延迟水果成熟的生物保鲜菌剂的方法，主要步骤为：1、基础培养基培养细菌；2、在诱导条件下继续培养细菌制成菌剂原料；3、收集微生物菌体，按特定比例混合配制菌剂；4、外源施用菌剂，延缓水果成熟。本方法制备的菌剂成本低廉，可以有效延长香蕉、苹果、牛油果、西红柿、桃、李等常见蔬果的保鲜时间，减少传统保鲜食用蜡和塑料薄膜的使用。另外，该方法使用纯生物制剂来延缓水果成熟，是一种绿色、环境友好的产品。

技术领域

本发明涉及一种微生物菌剂及其制备方法，尤其涉及一种可用于延长蔬果保鲜时长的微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

在水果运输、储藏、加工、销售以及食用前延迟其成熟时间，直接关系到果实的内在品质和经济收益。目前，市面上常见的水果保鲜技术包括应用银盐，高锰酸钾，1-甲基环丙烯，环丙稀等以及这些化合物的类似物，这些方法涉及重金属以及难闻的化学味道。另外，其它水果保鲜技术还包括水果表面打食用蜡；包裹保鲜膜；低温储存，气体封闭等。然而，这些方法存在较多的局限性，如：水果表面喷施的食用蜡不易清除，且过多摄入食用蜡会对人体产生不良影响；低温保存对水果储存设施要求较高，且耗能较大，同时不能应用于一些不宜冷藏的水果(如：香蕉)；表面包裹保鲜膜增加了水果储藏成本，同时会制造白色污染，不利环保。目前，利用微生物方法来抑制蔬果成熟的专利仍较少报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种用于延缓蔬果成熟的微生物菌剂及其制备方法，使用经过诱导培养的多种微生物，组成复合菌剂,以非直接接触的方式来延迟蔬菜和水果的成熟，从而增加保藏时间。

本发明是用数个微生物菌种组成的复合菌剂，与水果表面非直接接触后，延迟其成熟的时间，所涉及到的微生物包括：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，红球菌属(Xanthophyllomyces)，红曲霉菌(Monascus purpureus)，戈登氏菌属(Gordonia)，酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)和瘦果红酵母(Rhodotorula acheniorum)。上述细菌均可从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)采购获得。本发明所述的以上任何单一菌种诱导培养或由任意以上两种或两种以上诱导培养后的菌种混合制成菌剂，用于延迟蔬果的成熟，该菌剂的制备方法具体包括以下步骤：

1)基础培养：将枯草芽孢杆菌、红球菌属、红曲霉菌、戈登氏菌属、酵母菌和瘦果红酵母接种至各自的基础培养基中(包括nutrient broth，Sabouraud dextrose broth，tryptic soy broth等)，在30°摇床上培养1-4天；

2)诱导培养：分别制备各细菌相应的诱导培养基-I，是在各细菌原有的基础培养基的成分里加入以下几种物质：0.1-100mM Zn²⁺,0.1-100mM Ni²⁺，5-280mM维生素C，2-35mM维生素E(可优选采用维生素E307(α-Tocopherol))，0.006-0.7mM乙酰胆碱和0.005-0.45mMn-乙酰氨基葡萄糖；将步骤1)培养的各细菌离心收集并分别转入相应的诱导培养基-I中，在30°摇床培养3-5天；

再分别制备各细菌的诱导培养基-II，是在各细菌原有的基础培养基的成分里加入以下几种物质：0.1-100mM Fe²⁺或Fe³⁺,1-100mM Ca²⁺,1-100mM Mg²⁺和0.05-1M羟基脲；将经上述诱导培养基-I培养的各种细菌离心收集并分别转入相应的诱导培养基-II中，在30°摇床培养5天以上；

3)分别离心收集经步骤2)培养的各种菌体细胞，取枯草芽孢杆菌、红球菌属、红曲霉菌、戈登氏菌属、酵母菌和瘦果红酵母中的一种或几种的混合，获得微生物菌剂。