[发明专利]一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法

权利要求书

1.一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法，其特征是包括以下步骤：

（1）采集新鲜猪血，以5g／L的柠檬酸钠抗凝，在4℃、8000r／min离心10min，收集下层沉淀，以获得红血球；在红血球中加入同等体积的蒸馏水，超声波细胞破碎辅助溶血20min，然后在4℃、4000r／min离心10min，得到血红蛋白溶液，于4℃保存备用；

（2）取适量血红蛋白溶液，加入一定量的胰蛋白酶酶解，搅拌，1mol/LNaoH溶液维持体系pH8.0，45-55℃，4-6h；将酶解反应产物迅速升温至85℃并保持此温度10～15分钟，再迅速冷却至0～30℃以终止酶解反应，调节pH值至7.0左右，8000r／min离心15min，获得上清酶解液，4℃冷藏备用；

（3）活性炭用量为酶解液总重的5-30％，温度55℃，搅拌脱色20-30min；再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将粗滤酶解液在0.1～0.2Mpa的工作压力和0～45℃的工作温度下，采用截留分子质量为10kD超滤膜进行超滤处理，以除去大分子蛋白类物质，得超滤酶解液；再将超滤酶解液依次进行真空浓缩、冷冻干燥，得抗菌肽，-20℃保存。

2.根据权利要求1所述的一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法，其特征是：所述步骤（2）中胰蛋白酶是酶比活力10×10⁴u/g。

3.根据权利要求1所述的一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法，其特征是：所述步骤（2）中胰蛋白酶加酶量是3000U／g。