[发明专利]自血浆纯化免疫球蛋白

说明书

本发明涉及自血浆纯化靶分子像免疫球蛋白。某种类型的基于交联聚乙烯醚的离子交换剂的使用导致靶分子的特别高的收率。

本发明涉及自血浆纯化靶分子像免疫球蛋白。基于亲水性的化学上稳定的聚乙烯醚树脂的某些类型的离子交换剂的使用导致靶分子的特别高的收率。

发明背景

人和动物血包含许多蛋白和酶，其具有例如治疗性质。这些蛋白的一些可在红细胞中发现，而其它的在血浆或血清的溶液中发现。这样的蛋白是用于大规模和特异性分离的目标，目的是纯化和标准化所述蛋白用作人治疗剂。分离以供治疗应用的重要血蛋白的实例有：白蛋白、免疫球蛋白G、因子IX、因子VIII和α-1-蛋白酶抑制剂。这些蛋白的一些以每年数千kg的规模生产(白蛋白和IgG)，而其它的仅以每年克至千克的规模生产。然而，为了分离这些蛋白，在全世界范围内，每年有数百万升的血液被处理。

血、血浆和血清是极其复杂的含蛋白质的溶液，其包含许多并非目的蛋白或酶的其它类型的化合物。从这种类型的样品分离特异性靶分子需要复杂的且往往是多步的纯化程序。

特别是免疫球蛋白G的当前生产方法的一个常见问题是纯化过程中免疫球蛋白G的大量流失，估计为起始原料的总IgG含量的至少30%-35%。一个挑战是保持病毒失活和缺乏可引起不良反应的杂质的品质，同时扩大IgG的收率。在可被考虑的目前的IgG生产水平下，收率的小幅度增加实际上是非常重要的。即使效率的2%增加也将在收率和生产力方面产生显著的增加。

因此，存在对改进的和更有效的生产IgG产品的方法的需求。

发明简述

已经发现，某种类型的色谱材料或基质可以非常有效地用于来自血浆样品的靶分子的阴离子交换纯化。所述基质是携带600和1200 µmol/g之间的阴离子基团的亲水性聚乙烯醚。靶分子可以非常高的收率和极好的纯度获得。

本发明因此涉及一种自血浆样品纯化靶分子的方法，其通过以下方面进行：

a) 提供包含靶分子的血浆样品，

b) 使所述血浆样品经受在携带600和1200 µmol/g之间的阴离子基团的聚乙烯醚基质上的离子交换色谱，藉此自基质中洗脱纯化的靶分子。

在优选的实施方案中，所述基质是一种由至少一种来自组a)和b)的化合物的共聚而形成的共聚物，其中

a) 至少一种式I的亲水取代的烷基乙烯基醚

　　I

其中R1、R2、R3彼此独立地可以是H或C1-C6烷基，优选地H或CH₃，

和R4是携带至少一个羟基的基团

和

b) 至少一种符合式II和/或III和/或IV的交联剂，

　　II

其中X是具有2-5个C原子、优选2或3个C原子的二价烷基，其中不邻近的和不位于N的直接附近的一个或多个亚甲基可以被O、C=O、S、S=O、SO₂、NH、NOH或N替代和所述亚甲基的一个或多个H原子可以彼此独立地被羟基、C1-C6-烷基、卤素、NH₂、C5-C10-芳基、NH-(C1-C8)-烷基、N(C1-C8)-烷基₂、C1-C6-烷氧基或C1-C6-烷基-OH取代，和

　　III

　　IV