[发明专利]一种制备云南松树皮原花青素的方法

权利要求书

1.一种提取云南松树皮原花青素的制备方法，包括如下步骤：

1)将云南松树皮粉碎后过筛，于溶剂中进行酶解辅助浸提，得到酶解液；

2)将步骤1)所得酶解液依次进行胶磨均质和高压脉冲电场处理，再将所得产物离心，收集上层清液，浓缩，得到原花青素的粗提液；

3)将步骤2)所得原花青素的粗提液纯化，干燥，得到所述云南松树皮原花青素。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)过筛步骤中，筛孔的目数为20‐80目，优选40‐60目；

所述溶剂为水，粉碎后的云南松树皮与所述溶剂的料液比为1g：5‐15mL，具体为1g：5mL、1g：10mL或1g：15mL。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)酶解辅助浸提步骤中，所用酶选自酸性蛋白酶、纤维素酶和果胶酶中的至少一种，优选为果胶酶；

其中，所述酸性蛋白酶具体为胃蛋白酶；或，

所述酸性蛋白酶的酶活为1200‐2400U/mg，具体为1500U/mg；或，

所述纤维素酶的酶活为0.3‐1.0U/mg，具体为0.8U/mg；或，

所述果胶酶的酶活为0.5‐5.0U/mg，具体为1.0U/mg；

所用酶与粉碎后的云南松树皮的质量比为0.8‐1.4：100，具体为1：100。

4.根据权利要求1‐3中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤1)酶解辅助浸提步骤中，浸提的时间为60min‐120min，具体为60min、90min或120min；或，

浸提的温度为45℃‐55℃，具体为45℃、50℃或55℃；或，

浸提的pH值为3.0‐4.0，具体为3.0、3.5或4.0。

5.根据权利要求1‐4中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)胶磨均质步骤中，处理时间为15min‐30min，具体为20min。

6.根据权利要求1‐5中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)高压脉冲电场处理步骤中，电场强度为18‐24kV/cm，具体为21kV/cm；或，

处理脉冲数为4‐14个脉冲，具体为4、6、8、10、12或14个脉冲。

7.根据权利要求1‐6中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)离心步骤中，离心力为4000g‐6000g，具体为5000g；或，

离心的时间为10min‐30min，具体为15min。

8.根据权利要求1‐7中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)浓缩步骤中，浓缩的方式为真空浓缩；

所述真空浓缩中，真空度具体为0.1MPa；或，

真空浓缩的温度具体为40℃‐60℃，更具体为50℃；或，

真空浓缩的时间具体为20min‐60min，更具体为30min。

9.根据权利要求1‐8中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤3)纯化步骤中，纯化的方式为大孔树脂吸附；

所述大孔树脂具体选自弱极性或非极性的AB‐8、XAD180、X‐5、HPD‐100、HPD‐300或HPD‐700型号的大孔树脂，更具体为AB‐8型号的大孔树脂；或，

所述大孔树脂吸附步骤中，原花青素粗提液的流速具体为30‐90mL/h，更具体为60mL/h；或，

所用洗脱剂选用质量百分浓度为70％‐90％的乙醇水溶液，具体为85％的乙醇水溶液；或，

洗脱剂的pH值为3.0‐4.0，具体为3.5；或，

洗脱剂的流速为30‐90mL/h，具体为60mL/h；

所述步骤3)干燥步骤中，干燥的方式选自喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥和鼓风干燥中的至少一种，具体为喷雾干燥。

10.权利要求1‐9任一所述方法制备得到的云南松树皮花青素；或者，

以权利要求1‐9任一所述方法制备得到的云南松树皮花青素为活性成分的产品。