[发明专利]一种昆虫鞘翅石蜡切片方法有效
申请号: | 201510505600.8 | 申请日: | 2015-08-14 |
公开(公告)号: | CN105181406B | 公开(公告)日: | 2018-04-03 |
发明(设计)人: | 马玉堃;刘雪峰;李玲;王洪峰;沙依拉·帕那西 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30 |
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地址: | 150040 黑龙江省哈*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 昆虫 鞘翅 石蜡 切片 方法 | ||
1.一种昆虫鞘翅石蜡切片方法,其特征在于,方法如下:
步骤(1)把鞘翅目昆虫在蛹期区分雌、雄,羽化后在36-48小时间取其鞘翅用于石蜡切片;
步骤(2)鞘翅固定:将步骤(1)所得到的鞘翅要观察的部分剪切好,用FAA固定剂固定24小时;
步骤(3)鞘翅脱水:把固定的鞘翅组织用不同体积浓度的酒精依次脱水,脱水浓度与时间依次为:50%1-2小时、70%1-2小时、80%30分钟、90%30分钟、纯酒精20分钟、纯酒精10分钟;
步骤(4)鞘翅透明:将脱水的鞘翅放入到无水酒精和二甲苯的混合液中透明1-2小时,软石蜡和二甲苯混合液按体积配比=1∶1,透明1-2小时,再放入二甲苯中1小时;
步骤(5)鞘翅浸蜡:将透明过的鞘翅放入到55℃、已经融化的软石蜡和二甲苯混合液中3小时,软石蜡和二甲苯混合液按体积配比=1∶1;再放入到65℃、已经融化的硬石蜡和二甲苯混合液中3小时,硬石蜡和二甲苯混合液按体积配比=1∶1;65℃恒温再过度浸蜡6小时;
步骤(6)包埋与切片:取出鞘翅,在伯口纸盒中凝固成型后切片;
步骤(7)展片、粘片与拷片;
步骤(8)脱蜡复水;
步骤(9)染色后封片。
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