[发明专利]用于检测引起酱油变质的微生物的培养基及检测方法

说明书

技术领域

本发明的实施方式涉及酱油质量检测领域，更具体地，本发明的实施方式涉及一种用于检测引起酱油变质的微生物的培养基及检测方法。

背景技术

酱油作为一种传统调味品，其营养丰富、味道鲜美，是大豆、小麦等原料通过米曲霉作用酿造而成的，生产过程中酵母菌等有益微生物参与发酵形成风味物质，后期再通过加热灭菌方式杀灭酱油中的微生物，但若灭菌不彻底或灭菌后被微生物再次污染，这些微生物利用酱油中存在的糖类等营养物质，产气或形成菌膜，导致酱油浑浊、生花、涨瓶涨袋，严重影响产品质量。因此，建立一种国家标准之外，用于酱油中产膜、产气微生物的检测方法，在产品出厂之前判断是否存在可能导致酱油涨瓶、涨袋及浑浊、生花的有害菌，便于生产上及早发现、及早防治不合格品，具有十分重要的现实意义。

发明内容

本发明克服了现有技术的不足，提供一种用于检测引起酱油变质的微生物的培养基及检测方法，以期望可以检测出酱油灭菌不彻底或灭菌后被微生物再次污染的情况。

为解决上述的技术问题，本发明的一种实施方式采用以下技术方案：

一种用于检测引起酱油变质的微生物的培养基，所述变质是指酱油浑浊、生花或者产气，它包括以下原料：

将上述原料加入蒸馏水中搅拌、溶解后定容到1000mL，调节pH值至5.0±0.2即得培养基。

优选的技术方案是：所述用于检测引起酱油变质的微生物的培养基包括以下原料：

将上述原料加入蒸馏水中搅拌、溶解后定容到1000mL，调节pH值至5.0±0.2即得培养基。

微生物所需要的六类营养物质包括碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水，根据不同微生物对营养物质的需求不同，在配置培养基时，必须充分考虑到目的微生物的营养需求，有针对性的配置培养基，这样才有利于微生物的生长、繁殖、代谢及产物合成。

本发明以葡萄糖和蛋白胨为主要的营养物质，并添加酪蛋白、酵母膏、牛肉膏和氯化钠丰富培养基的营养。蛋白胨为微生物提供不同的氨基酸和多肽，以及C源、N源及生长因子等营养物质，葡萄糖为微生物提供碳源及能量，酪蛋白既能够为微生物提供蛋白营养，又能够促进微生物对其它元素的吸收，酵母膏、牛肉膏富含多种氨基酸、维生素、核苷酸、多肽及微量元素，能够为微生物的生长提供多种必需生长元素。氯化钠可以维持培养基均衡的渗透压。该培养基各成分均具有良好的溶解性，制成的液体培养基澄清，不会对后期结果判定产生干扰。

本发明明确了各种原料物质的种类和用量，这些原料物质易得且成本不高，而其用量之间相互配合，为产气、产菌膜的微生物提供了合适的碳源、氮源、能源、无机盐及维生素等营养物质。本发明限定了原料的用量，这种原料配方既能够满足产气、产菌膜对碳源、氮源、能源、无机盐及维生素等营养物质的需求，也不会浪费各种原材料，在微生物生长繁殖阶段不会缺少其所需的营养，有利于微生物的生长繁殖，更容易准确地检测出酱油中是否含有产气或产膜菌。在检测实验完成后，培养基的营养物质得到充分的利用。

本发明的原料配方还有一个优势，那就是既满足酱油中产气菌的生长繁殖及产气，也适合产膜菌的生长繁殖和产生菌膜，因此在检测时可同时检测两种异常现象的菌，判断是否存在引起涨袋、涨瓶、浑浊、生花等不良现象。

本发明还提供了利用上述培养基检测酱油中引起浑浊、生花及产气的微生物的方法，它包括以下步骤：

A、培养基分装、灭菌

取洁净试管，内置倒立的杜氏小管，每支试管分别装入27mL上述培养基，塞上试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121℃灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试管作为试管无菌培养基备用。

B、接种培养

在无菌操作下，取装有3～5颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入待测酱油样品，保持自然PH，充分振荡摇匀，取步骤A中的1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无菌培养基各接种3mL所述待测酱油样品，振荡均匀。

C、培养

将步骤B作为空白对照的试管无菌培养基和接种了3mL所述待测酱油样品的试管无菌培养基置于30-37℃恒温箱中培养48h，观察试管中是否出现气泡、浑浊、菌膜，沿试管壁缓慢加入甲基红指示剂，禁止摇动试管，观察培养液上层是否变黄；

D、结果判定