[发明专利]一种基于凝胶色谱柱检测多溴联苯醚羟基代谢物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种液质联用检测多溴联苯醚羟基代谢物的凝胶色谱柱的制备方法，以及该凝胶色谱柱检测多溴联苯醚羟基代谢物的检测方法，属于环境或食品检测技术领域。

背景技术

目前，环境和食品中的有机污染物种类越来越多，如多溴联苯醚及代谢物，它是一类卤代有机溴化阻燃剂(BFRs)，由于良好的阻燃性，它在工业领域被大量的使用在各种商业产品中，例如电子电器产品和纺织品。商业的多溴联苯醚产品主要包括五溴、八溴和十溴联苯醚。由于它们的理化性质和生物积累特征，如环境持久性和高疏水性导致了这类产品已经在自然环境中广泛分布。羟氧基多溴联苯醚(OH-PBDEs)是一类和多溴联苯醚结构相似的化合物,其毒性远强于其母体化合物(PBDES)。它不但能够可以引起人体的内分泌失调，还能通过破坏甲状腺对人体造成间接的健康影响，甚至还能直接通过其神经毒性来引起人体神经行为异常。多溴联苯醚羟基代谢物所处的基体通常十分复杂，含量也甚微，常以μg/kg计。目前，测定多溴联苯醚代谢物比较成熟的检测方法是液相色谱-质谱联用法，但是其结果的准确性很大程度受制于样品的杂质含量。如果这些杂质不经处理，则会对后续有机污染物的检测结果产生较大干扰，影响检测的结果。

发明内容

本发明解决了背景技术中的不足，提供了一种液质联用检测多溴联苯醚羟基代谢物的凝胶色谱柱，该凝胶色谱柱制备方法简单，能够有效克服复杂的基体效应，能对含有机污染物基体中的多种杂质进行分离，从而有效地除去多种杂质，避免了对后续有机污染物检测的干扰。

实现本发明上述目的所采用的技术方案为：

一种液质联用检测多溴联苯醚代谢物的凝胶色谱柱，所述凝胶色谱柱采用如下方法制备：(1)、称取聚苯乙烯凝胶和溶剂，其中每1克聚苯乙烯对应量取5～8毫升溶剂，所述的溶剂为环己烷和乙酸乙酯的混合溶液，将聚苯乙烯凝胶混合于溶剂中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间大于24小时，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用；

(2)、取一支干燥洁净的色谱柱以及一支硅胶软管，将硅胶软管连接在色谱柱的下端出口处，然后向色谱柱内加入占柱体积20～30％的溶剂，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞；

(3)、将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2～3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至柱体积5/6处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1/12柱体积的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。

步骤(1)所述的溶剂中环己烷和乙酸乙酯的体积比为1:1。

步骤(2)所述的色谱柱的长径比为8～10:1。

本发明同时还提供了基于上述凝胶色谱柱检测多溴联苯醚羟基代谢物的方法，该方法有操作简单、重现性好、灵敏度高和准确度高的优点。该方法包括以下步骤：(1)、将待测样品与硅藻土按照1:8～10的体积比混合，再用环己烷和乙酸乙酯按照1:1的体积比混合后的溶液进行洗脱，收集并浓缩待测样品洗脱液，制得浓缩液A；

(2)、在浓缩液A中加入内标碳13标记内标4′-OH-BDE-17、3′-OH-BDE-28、2′-OH-BDE-28、4′-OH-BDE-49、6-OH-BDE-47、2′-OH-BDE-68、6-OH-BDE-85、5′-OH-BDE-99、4′-OH-BDE-101、3′-OH-BDE-154和4-OH-BDE-187的混合标准溶液，浓度为100ng/mL；将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐；

(3)、采用1.2～1.4倍柱体积的环己烷和乙酸乙酯进行洗脱，洗脱流速为1.00～1.50mL/min，弃去前50～60％柱体积的洗脱液，收集剩余部分的洗脱液于蒸发瓶中，后续经旋转蒸发与氮吹浓缩至0.9～1.1mL，制得浓缩液B，供LC-MS检测用；