[发明专利]一种兼性需氧菌的简易批量培养方法

权利要求书

1.一种兼性需氧菌的简易批量培养方法，其特征在于：采用密封箱体多层方盘固体平面发酵装置培养；所述的密封箱体和方盘是以不易变形的耐热薄板材质制作，方盘的数量为10~20个，密封箱体的大小以仅能容纳指定数量层叠放置的方盘为准；所述密封箱体开口处设有遮蔽开口的密封盖，所述密封盖与箱体开口边缘之间设有密封胶垫，所述密封盖、密封胶垫及箱体经贯穿三者的锁闭螺丝固定连接；锁闭螺丝设置于密封盖四角，密封盖的对角处分别设置有2个直径为22mm的接种孔，接种孔用硅胶塞密封。

2.根据权利要求1所述的兼性需氧菌的简易批量培养方法，其特征在于：所述的不易变形的耐热薄板材质是不锈钢。

3.根据权利要求1所述的兼性需氧菌的简易批量培养方法，其特征在于：每个方盘的尺寸根据生产需求进行设定。

4.根据权利要求1所述的兼性需氧菌的简易批量培养方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）通过密封盖上预留的接种孔，注入按方盘内表面积计算能形成厚度为3mm~5mm凝胶的琼脂培养基混悬液，用硅胶塞密封接种孔，置高温灭菌设备中常规灭菌，待箱体温度降至50℃~60℃，震荡箱体混匀培养基，以方盘位置为基准竖立箱体，静置片刻使琼胶从缝隙中流入方盘，待琼胶液面平衡稳定，快速水平放置箱体并使方盘开口朝上，使融化的琼脂均匀分布于每个方盘中；

2）待琼脂降温凝固，按箱体容积的1%~2%接种液体菌种，接种采取无菌术式，借助超净工作台或火焰封闭将菌种注入或滴入接种孔中，菌种浓度保持5亿个/ml以上，接种后以方盘位置为基准竖立箱体，静置片刻使菌液从缝隙中流入方盘，待菌种液面平衡稳定，快速水平放置箱体并使方盘开口朝上，轻轻倾斜、往返震荡箱体使菌种充分涂布于琼脂培养基表面，培养形成菌苔；

3）培养物收获时按箱体容积的15%~20%注入冲洗液，震荡箱体充分洗涤菌苔后倾斜箱体，通过接种孔导出洗涤液即获得浓缩纯培养菌液。

5.根据权利要求4所述的兼性需氧菌的简易批量培养方法，其特征在于：细菌在多层方盘固体培养基上发酵培养，采用一次性注入培养基、一次性灭菌、一次性形成多层培养表面、一次性接种、一次性洗涤收获。