[发明专利]门多萨假单胞菌NX-1及其在正己烷降解中的应用

说明书

本发明提供了一株高效新型正己烷降解菌——门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)NX‑1及其在微生物降解正己烷中的应用；门多萨假单胞菌NX‑1，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉大学，430072，保藏日期：2015年3月15日，保藏编号：CCTCC NO：M2015114；本发明提供的正己烷降解菌为好氧非发酵型革兰氏染色阴性菌，能利用正己烷作为唯一碳源繁殖并将该底物完全矿化成CO2和H2O；在纯培养条件下，该菌pH 4.0～10.0范围内均能降解正己烷；该菌株有较强的环境适应能力，为生物法净化含正己烷废水及废气的工程应用奠定了基础。

(一)技术领域

本发明涉及一株高效新型正己烷降解菌——门多萨假单胞菌(Pseudomonasmendocina)NX-1及其在微生物降解正己烷中的应用。

(二)背景技术

正己烷(n-hexane，C6H6)是一种低毒、有微弱的特殊气味的无色液体。它是一种化学溶剂，主要用于丙烯等烯烃聚合时的溶剂、食用植物油的提取剂、橡胶和涂料的溶剂以及颜料的稀释剂，具有一定的毒性，会通过呼吸道、皮肤等途径进入人体，长期接触可导致人体出现头痛、头晕、乏力、四肢麻木等慢性中毒症状，严重的可导致晕倒、神志丧失、甚至死亡。

由于正己烷的广泛应用以及长期吸入正己烷会导致慢性中毒，研发出经济又有实效的处理正己烷的方法已经成为环境污染控制领域的研究热点。正己烷的生物降解已被证明是可行的，如利用生物滴滤器处理高负荷正己烷废气，已达到70％-90％的降解率。尽管如此，目前国内对正己烷的生物降解研究较少，很少有报道筛选出以正己烷为唯一碳源的高效降解菌株。本发明从环境中筛选到一株能高效降解正己烷的菌株，为含该类污染物的废水和废气的生物净化工程应用奠定基础。

微生物是一类种类多，繁殖快，适应性强，代谢能力强的生物体。若能筛选并能分离出高效降解正己烷的微生物，将正己烷降解成对人体和环境无毒害的物质，这对维持人类的将抗和生态安全有着深远的意义。

(三)发明内容

本发明的目的在于提供一株新型高效正己烷降解菌——门多萨假单胞菌NX-1及其在微生物降解正己烷中的应用。

本发明采用的技术方案是：

门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)NX-1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2015年3月15日，保藏编号：CCTCC NO:M2015114，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072。

所述门多萨假单胞菌NX-1的16s rDNA的Genebank登录号为KP938962，该菌株的主要生物学特征为：菌体呈椭圆状，大小为(0.3～0.6)μm×(0.8～2.0)μm，无芽孢，有鞭毛；菌落呈椭圆状、透明、形态饱满、光滑湿润，易挑起，菌苔沿划线生长；好氧，氧化酶反应为阳性，吲哚反应、接触酶反应、柠檬酸盐为阳性；M.R反应、V.P.反应为阴性；糖发酵实验阴性，革兰氏染色阴性。

本发明还涉及所述的门多萨假单胞菌NX-1在微生物降解正己烷中的应用，具体的，所述的应用为：将门多萨假单胞菌NX-1经种子培养基(优选含终浓度100～400mg/L正己烷的种子培养基)培养所得的菌液作为酶源，以正己烷为底物，于无机盐培养基中，在pH＝4～10、20℃～40℃，100～200rpm条件下(优选pH＝6～9、25℃～35℃，100～200rpm)进行降解反应，实现对正己烷的降解，优选种子培养基为无机盐培养基。

所述底物正己烷在无机盐培养基中初始浓度为20～800mg/L无机盐培养基(优选100～400mg/L)，所述酶源用量以无机盐培养基中OD600计为0.01～0.03。