[发明专利]一种基于CRISPR的大肠杆菌O157:H7菌株检测试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201510514478.0 | 申请日： | 2015-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN105112519A | 公开（公告）日： | 2015-12-02 |
| 发明（设计）人： | 段广才;梁文娟;张荣光;杨海燕;张卫东;郗园林;范清堂 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 450001 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 crispr 大肠杆菌 o157 h7 菌株 检测 试剂盒 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种基于CRISPR的大肠杆菌O157:H7菌株检测试剂盒，同时本发明还涉及一种基于CRISPR的大肠杆菌O157:H7菌株检测方法，属于分子生物学技术领域。
背景技术
大肠杆菌O157:H7是大肠杆菌的一个主要致病菌株，O157:H7感染不仅可引起出血性结肠炎、阑尾炎、食管狭窄和结肠穿孔等严重胃肠道并发症(PaiCH,GordonR,SimsHV,etal.SporadicCasesofHemorrhagicColitisAssociatedwithEscherichiaColiO157:H7.Clinical,Epidemiologic,andBacteriologicFeatures[J].AnnalsofInternalMedicine,1984,101(6):738-742)，而且在儿童和老年人群中还可引起溶血性尿路综合症(hemolyticuremicsyndrome，HUS)和血栓性血小板紫癜(thromboticthrombocytopenicpurpura，TTP)等全身性并发症，严重者肾衰竭导致死亡(MoriY,WadaH,TamakiS,etal.OutcomeofThromboticThrombocytopenicPurpuraandHemolyticUremicSyndromeinJapan[J].ClinicalandAppliedThrombosis/hemostasis:OfficialJournaloftheInternationalAcademyofClinicalandAppliedThrombosis/hemostasis,2000,5(2):110-112)。目前，大肠杆菌O157:H7检测方法主要有常规检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法。常规监测法的成本较高，而分子生物学检测法简便、快速，常以特异性的编码基因如rfbE基因、鞭毛抗原H7特异基因flic、stx(志贺样毒素)、hly(溶血素)、eaeA(编码粘附素)等作为靶基因(PinaM.FRATAMICO,ChitritaDEBROY.DetectionofEscherichiaColiO157:H7inFoodUsingReal-timeMultiplexPcrAssaysTargetingtheStx1,Stx2,WzyO157,andtheFlicH7OrEaeGenes[J].FoodAnalyticalMethods,2010,3(4):330-337)，具有特异性强、操作简便、结果准确等优点，是检测大肠杆菌O157:H7的常用方法。
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