[发明专利]一种利用啤酒废液生产酵母发酵态铁饲料添加剂的方法

说明书

一种利用啤酒废液生产酵母发酵态铁饲料添加剂的方法，其步骤包括培养基制备以及微生物培养、制备基础液体培养基与铁梯度培养基、微生物梯度培养、制备种子培养基、制备发酵种子、制备发酵液、微生物发酵、制作酵母发酵态铁饲料添加剂与包装。本发明提供了一种利用啤酒生产过程中糖化废水和发酵废水生产酵母发酵态铁饲料添加剂的处理方法，方法简单，容易操作，效果理想，既提高了资源利用效率，降低了生产成本，又可以对啤酒生产中的废水进行生物处理，减少了环境污染，所制备的酵母发酵态铁饲料添加剂生物有效性高，对动物的添加量低，并能提高动物的生产性能。

技术领域

本发明属于饲料添加剂及生物技术领域，尤其是一种利用啤酒废液生产酵母发酵态铁饲料添加剂的方法。

背景技术

铁是动物体必需的微量元素之一。缺铁易导致机体耐性降低、生产性能下降和免疫力低下，严重缺铁导致缺铁性贫血。在日粮中额外添加铁化合物是补充动物体铁需要的重要措施。研究发现，无机态铁盐在进入动物肠道后，容易离解出铁离子，并与饲料中抗营养成分结合，从而降低其生物学利用率，同时，造成大量铁随粪便排出污染环境。因此，研制高利用率的新型铁饲料添加剂意义重大。

我国是啤酒生产消费大国，在其生产过程中会产生20-30倍的废水，其中糖化废水和发酵废水中有机养分含量丰富。研究表明，糖化和发酵后排放的废水COD浓度在2000~4000mg/L，并且以可溶态的糖类、氨基酸、醇类、维生素等为主。通过对其营养成分调控后，能够作为微生物的营养基质来生产一系列微生物发酵类产品。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用啤酒废液生产酵母发酵态铁饲料添加剂的方法，选用中华人民共和国农业部1126号公告《饲料添加剂品种目录（2008）》批准使用的啤酒酵母菌和产朊假丝酵母作为发酵菌种，将啤酒生产过程中的废液（糖化废液和发酵废液）经过适当理化性质调控后作为发酵液，对无机铁化合物进行发酵处理，研制酵母发酵态的铁饲料添加剂，从而提高铁的吸收利用率，降低粪便铁排出对环境的污染。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种利用啤酒废液生产酵母发酵态铁饲料添加剂的方法，所用的发酵菌种为啤酒酵母和产朊假丝酵母，所用的铁为可溶解在稀酸溶液中的无机铁化合物，具体制备步骤如下：

（1）培养基制备以及微生物培养

取葡萄糖20g、蛋白胨20g、酵母浸膏10g、琼脂20g，用蒸馏水溶解、定容至1000mL，用高压锅在121℃灭菌20min-30min，调pH至5.0~5.5，制得培养基，然后将啤酒酵母和产朊假丝酵母从冰箱取出复苏，培养于该培养基上24h，以获得复活的啤酒酵母和产朊假丝酵母；

（2）基础液体培养基与铁梯度培养基制备

基础液体培养基的制法为：依次向1000ml蒸馏水中加入葡萄糖20g、蛋白胨20g以及酵母浸膏10g，并搅拌混匀，调整pH至5.0~5.2，备用；

铁梯度培养基的制法为：在上述基础液体培养基中加入可溶解在稀酸溶液中的无机铁化合物，得到铁含量分别为50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L、600mg/L、800mg/L和1000mg/L的培养基，并与铁含量为0mg/L的基础液体培养基构成铁梯度培养基，备用；

（3）微生物梯度培养

将步骤（1）处理所获得的啤酒酵母和产朊假丝酵母分别依次培养于步骤（2）所制得铁梯度培养基中，培养时间为24h，培养温度为30.5℃；

（4）种子培养基的制备

获取啤酒生产过程中新鲜的糖化废液，在4000r/min转速下离心5~10min，然后按照重量比添加3.5%的蔗糖、0.3%的尿素、0.25%的食盐、0.02%的硫化钠，混匀后121℃灭菌15~20min，并调pH至5.0~5.5，即制成种子培养基，并将其平均分做两份，备用；