[发明专利]分离纯化葛根素的方法有效
申请号: | 201510518805.X | 申请日: | 2015-08-24 |
公开(公告)号: | CN105017235B | 公开(公告)日: | 2017-11-24 |
发明(设计)人: | 方专;左伟;王敬;江威;姚波;龙成全;赵东明 | 申请(专利权)人: | 成都天台山制药有限公司 |
主分类号: | C07D407/04 | 分类号: | C07D407/04 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 611531 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 纯化 葛根 方法 | ||
1.分离纯化葛根素的方法,其包括以下步骤:以乙酸乙酯、正丁醇和水组成的三元溶剂体系为分离溶剂体系,采用高速离心分配色谱法对葛根素提取物进行分离纯化,得到葛根素;所述的高速离心分配色谱法在高速离心分配色谱仪中进行;所述乙酸乙酯、正丁醇和水的体积比为2:1:3,且该三元溶剂体系中添加有0.2~0.4%甲酸。
2.根据权利要求1的方法,所述的高速离心分配色谱仪的转速为1800r/min~2300r/min。
3.根据权利要求1的方法,所述的高速离心分配色谱法中,将高速离心分配色谱法所采用的三元溶剂体系充分混合后分层,取下层溶液为固定相,上层溶液为流动相;进一步将固定相和流动相过滤后超声备用,所述的过滤采用微孔滤膜过滤,所述的滤膜的孔径为0.3μm~0.5μm,所述的超声的时间为15min~30min,所述的超声的频率为16KHz~28KHz。
4.根据权利要求3的方法,将葛根素提取物溶解于所述固定相和流动相形成的混合溶液中,过滤后上样;所述的固定相和流动相形成的混合溶液中所述的流动相与所述的固定相的体积比为1:4。
5.根据权利要求1的方法,所述的葛根素提取物为采用普通超声提取法、循环超声提取法或者回流提取法得到的葛根素提取物。
6.根据权利要求1的方法,所述的高速离心分配色谱仪的流速为2.0mL/min~7.0mL/min。
7.根据权利要求1的方法,所述的高速离心分配色谱仪的流速为2.0mL/min~3.0mL/min。
8.根据权利要求1的方法,所述的高速离心分配色谱仪的上样浓度为10mg/mL~60mg/mL。
9.根据权利要求1的方法,其包括以下步骤:
步骤1:将三元溶剂体系充分混合后分层,取下层溶液为固定相、上层溶液为流动相;将葛根素粗品溶解于固定相与流动相的混合溶液中,形成葛根素提取物的溶液;
步骤2:高速离心分配色谱仪在递减模式下充满固定相;转换成递增模式后,再将流动相泵入离心分配色谱仪内;待体系平衡完毕后,由进样阀注入步骤1中制得的葛根素提取物的溶液,然后根据检测器图谱接收目标组分即可。
10.根据权利要求9的方法,步骤1中,将所述的固定相和流动相过滤后经超声处理后再用;所述的过滤是通过微滤膜过滤,所述的滤膜的孔径为0.45μm,所述的超声的频率为16KHz~28KHz,所述的超声的时间为15min~30min。
11.根据权利要求9的方法,步骤1中,用于溶解葛根素提取物粗品的固定相与流动相的混合溶液,其中流动相与固定相的体积比为1:4。
12.根据权利要求9的方法,步骤2中,所述的在高速离心分配色谱仪在递减模式下充满固定相,在高流速和低转速下进行,所述的高流速是流速在5mL/min~10mL/min范围内;所述的低转速是转速在600r/min~800r/min范围内。
13.根据权利要求9的方法,步骤2中,所述的转换成递增模式后,再将流动相泵入离心分配色谱仪内,转换成递增模式后提高转速至1800r/min~2300r/min。
14.根据权利要求9的方法,步骤2中,在接收目标组分后还包括除去溶剂,干燥得到葛根素单体的步骤;所述的除去溶剂在减压条件下进行,所述的除去溶剂的压强为-0.01MPa~0.08MPa,所述的除去溶剂的温度70℃~75℃;所述的干燥条件是在减压条件下进行,所述的干燥压强为0.07MPa~0.09MPa,所述的干燥温度为60℃~65℃。
15.根据权利要求9的方法,步骤2中,所述的高速离心分配色谱仪是转速1500~3000r/min的高速离心分配色谱仪。
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