[发明专利]分离纯化葛根素的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种分离纯化葛根素的方法，特别是涉及一种以高回收率、高生产效率制备高纯度葛根素的方法。

背景技术

葛为多年生豆科缠绕藤本植物，侧蔓和须根多，但块根深生，呈纺锤形或长棒形，表皮为淡黄色，有皱褶，是主要食用和药用部分。葛根为野葛Pueraria Lobata(Willd.)Ohwi或粉葛P.thomsomi Benth的干燥根。葛根作为常用中药，始载于《神农本草经》，列为中品，历代以来本草均有记载，味甘、辛、性平，具有解肌退热、生津、透疹、温阳止泻、提高机体免疫力等功能。目前，葛根广泛用于改善心脑血管、治疗感冒、糖尿病、腹泻等中药复方制剂中，用量极大，是制剂的重要成分。葛根含有异黄酮类、三萜类、芳香类等活性成分。其中异黄酮类化合物是葛根的主要化学成分，而葛根素(Puerarin)是葛属植物的特有成分，亦为主要有效成分。葛根素的药理作用十分广泛，具有降血脂，抗炎，抗心律失常、对心肌缺血的保护作用、扩张冠状动脉血管、肾保护、抗氧化、抗缺血再灌注损伤、抗肝缺血再灌注损伤、抗酒精中枢抑制、调控骨代谢、降血糖、利尿、降低血压、防治高血压头晕、头痛、颈项疼痛等作用。葛根素的化学结构式如下式所示：

随着葛根素的药理作用的研究深入，葛根素的分离纯化也越来越受到人们的重视。目前葛根素纯化方法主要有：大孔吸附树脂法、柱层析、酸水解有机溶剂萃取法及金属离子络合法等。

目前大部分企业提取葛根中葛根素时都采用传统生产方法，具体操作如下。

1.葛根预处理:葛根清洗-烘干-粉碎。

2.提取方法，通常有三种，具体如下。

2.1超声辅助提取法:葛根粉→超声提取→过滤→减压浓缩→过柱→水洗→醇洗→减压浓缩→真空 干燥→葛根素粗提物。

2.2水提取法:葛根干粉→水提取→过滤，得滤液和渣→用浓度5％的NaOH水溶液再提取渣→过滤，得滤液→合并两次的滤液→减压浓缩→调PH值→离心分离→滤液上硅胶柱→水洗→95％乙醇洗脱→洗脱液减压浓缩至干→葛根素。

2.3醇提法:葛根干粉→乙醇回流提取→过滤，得滤液和渣→渣再乙醇回流提取→过滤→合并两次的滤液→减压浓缩→离心分离→调滤液的PH值→再过滤→滤液浓缩至干→葛根素。

以上提取葛根素的方法，虽能得到葛根素粗提物，但操作周期长，工艺复杂，收率也不高，经检测所得的葛根素的含量也不高；最主要的是葛根中含有大量的淀粉不能得到充分利用，造成了资源的浪费。

此外，有诸多专利文献在分离纯化葛根素方面付出了巨大努力。例如，中国专利申请公开号CN1154849A采用正丁醇萃取后经三氧化二铝柱脱色得到纯度97％以上的葛根素产品；中国专利申请公开号CN1927876A经过离子交换大孔树脂层析再经过大孔树脂层析可以获得葛根素含量很高的葛根素提取物；中国专利申请公开号CN1398872A通过大孔吸附树脂及硅胶柱层析可得到高纯度葛根素。

中国专利申请公开号CN 103709152 A(201310729209.7)公开了一种葛根素的分离纯化方法，包括以下步骤：以乙酸乙酯、正丁醇和水组成的三元溶剂体系为分离溶剂体系，采用高速离心分配色谱法对葛根素提取物进行分离纯化得到葛根素即可；所述的高速离心分配色谱法在高速离心分配色谱仪中进行；据信该发明的葛根素的分离纯化方法步骤简单、分离时间短、分离能力强、分离到的葛根素纯度高(HPLC纯度大于99％)、回收率高(大于65％)。

尽管据信现有技术能够得到较高纯度的葛根素，然而这些现有技术的生产效率是相当低的，通常难以满足工业生产的要求。为此，本领域仍然期待有新的分离纯化葛根素的方法，以其高效地获得高纯度的葛根素。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术中葛根素的分离方法步骤繁琐、分离时间长、分离能力差、分离到的葛根素纯度差、回收率低等缺陷，和/或为了提高生产效率，而提供了一种葛根素的分离纯化方法。本发明的葛根素的分离纯化方法步骤简单、分离时间短、分离能力强、分离到的葛根素纯度高(HPLC纯度大于99％)、回收率高(大于65％)，特别是，本发明方法具有显著更高的生产效率。本发明方法具有良好的市场开发前景。

在本发明的第一方面，本发明提供了一种分离纯化葛根素的方法，其包括以下步骤：以乙酸乙酯、正丁醇和水组成的三元溶剂体系为分离溶剂体系，采用高速离心分配色谱法对葛根素提取物进行分离 纯化，得到葛根素；所述的高速离心分配色谱法在高速离心分配色谱仪中进行。