[发明专利]一套用于单增李斯特菌检测的多核苷酸、方法和试剂盒有效
申请号: | 201510520175.X | 申请日: | 2015-08-21 |
公开(公告)号: | CN105177127B | 公开(公告)日: | 2018-05-22 |
发明(设计)人: | 李妍;刘刚;许丽;梁文;闻艳丽;李兰英;徐勤;任淑贞 | 申请(专利权)人: | 上海市计量测试技术研究院 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12N15/10 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 陈详;刘妍珺 |
地址: | 200040 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一套 用于 李斯特 检测 多核苷酸 方法 试剂盒 | ||
1.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含分离的第一多核苷酸,所述第一多核苷酸为序列如SEQ ID NO.:3所示的多核苷酸序列,并且所述试剂盒中还包括第一引物对,所述第一引物对用于特异性扩增单增李斯特菌内化素基因InlA的基因序列,所述第一引物对为SEQ ID NO.:5和SEQ ID NO.:6所示的引物序列。
2.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含一种分离的DNA构建物,所述DNA构建物中包含SEQ ID NO.:3的多核苷酸,以及任选的标签序列、酶切序列、启动子序列和/或载体序列,并且所述试剂盒中还包括第一引物对,所述第一引物对用于特异性扩增单增李斯特菌内化素基因InlA的基因序列,所述第一引物对为SEQ ID NO.:5和SEQ ID NO.:6所示的引物序列。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述DNA构建物为质粒或表达载体,所述质粒或表达载体的序列如SEQ ID NO:4所示。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括探针,所述探针序列如SEQ ID NO.:13所示。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括:分离的第二多核苷酸,所述第二多核苷酸为序列如SEQ ID NO.:1所示的多核苷酸序列,以及第二引物对,所述第二引物对特异性扩增单增李斯特菌的转录激活调节蛋白基因prfA基因序列,所述第二引物对为SEQ ID NO.:14和SEQ ID NO.:15所示的引物对。
6.如权利要求1所述的试剂盒的用途,其特征在于,用于单增李斯特菌的检测,所述检测为非诊断目的。
7.一种单增李斯特菌实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于,所采用的试剂盒如权利要求1-5中任一项所述,并且所述的检测是非诊断目的和非治疗目的。
8.一种多核苷酸产品,其特征在于,所述产品包括:
(i)单增李斯特菌标准品,所述的标准品为DNA构建物,所述DNA构建物中包含序列如SEQ ID NO.:3所示的多核苷酸序列;
(ii)特异性扩增单增李斯特菌序列的引物对,所述引物对为:
SEQ ID NO.:5和SEQ ID NO.:6所示的序列构成的引物对。
9.如权利要求8所述的多核苷酸产品,其特征在于,所述的产品还包括SEQ ID NO.:14和SEQ ID NO.:15所示的序列构成的引物对。
10.如权利要求8或9所述的多核苷酸产品,其特征在于,所述的产品还包括(iii)探针,所述探针序列如SEQ ID NO.:13或SEQ ID NO.:20所示。
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