[发明专利]一种酶活提高的L-天冬酰胺酶突变体及其构建方法有效
| 申请号： | 201510526470.6 | 申请日： | 2015-08-25 |
| 公开（公告）号： | CN105062997A | 公开（公告）日： | 2015-11-18 |
| 发明（设计）人： | 饶志明;龙水清;张显;杨套伟;徐美娟 | 申请（专利权）人： | 江南大学;江南大学（如皋）食品生物技术研究所;如皋江大食品生物技术研究所有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/82 | 分类号： | C12N9/82;C12N15/55;C12N1/21;A61K38/50;A61P35/02;A23L1/01;C12R1/125 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 天冬 酰胺酶 突变体 及其 构建 方法 | ||
1.一种L-天冬酰胺酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。
2.编码权利要求1所述突变体的基因。
3.一种含有权利要求2所述基因的重组表达载体。
4.一种表达权利要求1所述L-天冬酰胺酶突变体的基因工程菌。
5.一种制备权利要求4所述基因工程菌的方法，其特征在于，是在SEQIDNO.4所示序列的基础上，将第107位甘氨酸突变成天冬氨酸，得到重组基因，将重组基因连到表达载体得到重组质粒，重组质粒转化到枯草芽孢杆菌宿主菌中即得到枯草芽孢杆菌基因工程菌。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述方法具体是:(1)以SEQIDNO.4所示核酸序列为模板，以序列如SEQIDNO.5、SEQIDNO.6所示的引物，进行PCR，即得到编码的107位氨基酸由甘氨酸突变成天冬氨酸的G107D突变体基因序列；(2)将上一步得到的重组基因序列，连接到pMA5表达载体中，得到重组质粒pMA5-G107D，重组质粒化转化B.Subtilis，获得重组枯草芽孢杆菌基因工程菌。
7.权利要求1所述L-天冬酰胺酶突变体在制备治疗急性淋巴细胞白血病及霍金森病的药物中的应用。
8.权利要求1所述L-天冬酰胺酶突变体在减少油炸食品中丙烯酰胺生成中的应用。
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