[发明专利]脂质灭菌方法

权利要求书

1.一种磷脂悬浮液的灭菌方法，其包括：

(i)在夹套式容器中将所述磷脂与丙二醇在水性生物相容性载体中混合，以得到水性磷脂悬浮液；和

(ii)将来自步骤(i)的水性磷脂悬浮液高压灭菌，其中所述高压灭菌能够使灭菌系统所有部分的F₀值达到15和25之间，并且其中，除了来自加热所述容器夹套的显热之外，加热还包括加入蒸汽至步骤(i)的容器的顶部空间；

(iii)冷却来自步骤(ii)的热悬浮液至15-30℃以得到无菌磷脂悬浮液；

其中所述磷脂为氢化卵磷脂酰丝氨酸。

2.权利要求1所述的方法，其中将蒸汽添加至所述顶部空间在高压灭菌周期中实施多次。

3.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中进一步包括在向所述顶部空间添加蒸汽之前，向步骤(i)的容器的顶部空间应用真空。

4.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中相对于磷脂酰丝氨酸、磷脂酸、丝氨酸、游离脂肪酸、溶血磷脂酸和溶血磷脂酰丝氨酸的总和，磷脂酰丝氨酸的含量在步骤(iii)的无菌磷脂悬浮液中为至少68％。

5.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中相对于磷脂酰丝氨酸、磷脂酸、丝氨酸、游离脂肪酸、溶血磷脂酸和溶血磷脂酰丝氨酸的总和，磷脂酸的浓度在步骤(iii)的无菌磷脂悬浮液中小于15％。

6.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中在灭菌过程中磷脂酰丝氨酸被降解成磷脂酸，和磷脂酰丝氨酸和磷脂酸在步骤(iii)的无菌磷脂悬浮液中的组合浓度为5mg/mL。

7.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中磷脂与丙二醇的质量比为1∶2。

8.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中在步骤(ii)中使用洁净蒸汽。

9.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中步骤(i)的水性磷脂悬浮液的体积在20至80L的范围内。

10.一种超声造影剂前体的制备方法，所述前体包括在蔗糖中用氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷的微泡的冻干组合物；其中所述方法包括：

(i)实施权利要求1至9中任一项所述的方法，以获得氢化卵磷脂酰丝氨酸的无菌水性悬浮液；

(ii)在来自步骤(i)的悬浮液中形成全氟丁烷的微泡，以得到经氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷微泡的水性悬浮液；

(iii)用无菌蔗糖水溶液稀释来自步骤(ii)的悬浮液，以获得5-20％w/v的最终蔗糖浓度；

(iv)分配一等份来自步骤(iii)的组合物至小瓶中，以得到充满的小瓶；

(v)冷冻干燥来自步骤(iv)的充满的小瓶；

(vi)向来自步骤(v)的冷冻干燥小瓶的顶部空间气体中回填全氟丁烷；

(vii)用封盖密封来自步骤(vi)的每个小瓶。

11.一种用于制备超声造影剂的试剂盒的制备方法，其包括：

(i)实施权利要求10所述的方法，得到包含权利要求10中定义的造影剂前体的小瓶；和

(ii)准备一个适用于重构来自步骤(i)的所述前体小瓶以得到所述的造影剂的无菌水性介质的容器；其中所述超声造影剂包含在所述无菌水性介质中经氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷的微泡的悬浮液。

12.权利要求11所述的方法，其中无菌水性溶液是含有总浓度小于100μM的游离铝、钡、镁、钙和锌离子的注射用水。

13.一种超声造影剂的制备方法，其包括：

(i)实施权利要求10所述的方法，得到含有权利要求10中定义的造影剂前体的小瓶；和

(ii)用无菌水性溶液重构来自步骤(i)的前体小瓶；

其中所述超声造影剂包含在所述无菌水性介质中经氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷的微泡的悬浮液。

14.权利要求13所述的方法，所述方法使用权利要求11中定义的试剂盒实施。