[发明专利]可生产正丁醇的菌株及其应用有效
申请号: | 201510531354.3 | 申请日: | 2015-08-26 |
公开(公告)号: | CN105062942B | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 赵云鹏;赛尼·莫卡西;姜中人 | 申请(专利权)人: | 逢甲大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P7/16;C12R1/19 |
代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 董科 |
地址: | 中国台湾台*** | 国省代码: | 台湾;71 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 可生产 丁醇 菌株 及其 应用 | ||
1.一种可生产正丁醇的菌株,其特征在于,属于大肠杆菌且包括:
一丙酮丁醇梭杆菌的hbd基因、一丙酮丁醇梭杆菌的crt基因、一丙酮丁醇梭杆菌的adhE2基因、一钩虫贪铜菌的phaA基因、一齿垢密螺旋体的ter基因、一酿酒酵母的fdh1基因、多个启动子PλPL、一操作子lacO;
其中,各该启动子PλPL为镶嵌于该菌株的染色体,该染色体上的zwf基因、pgl基因、udhA基因、以及aceEF基因操纵组-E354K点突变的lpdA基因为分别各自受一个启动子PλPL调控;
该hbd基因与该phaA基因、该crt基因、该adhE2基因、该ter基因、为分别各自受一个该启动子PλPL调控;
其中,该操作子lacO为镶嵌于该菌株的染色体,以调控该染色体上的gltA基因;
该fdh1基因受一Ptrc启动子调控;
其中,该菌株缺少pgi基因、ldhA基因、pta基因、adhE基因、frdA基因。
2.如权利要求1所述的菌株,其特征在于,衍生自大肠杆菌BL21。
3.如权利要求1所述的菌株,其特征在于,各该启动子PλPL分别各自为镶嵌于该zwf基因、该pgl基因、该udhA基因、及该aceEF基因操纵组-E354K点突变的lpdA基因的上游区域。
4.如权利要求1所述的菌株,其特征在于,该操作子lacO为镶嵌于该gltA基因的上游区域。
5.一种生产正丁醇的方法,其特征在于,包括:
培养如权利要求1至4中任一所述的菌株于一含葡萄糖的M9Y培养基中。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,该培养基包含:
6g/L磷酸氢二钠、3g/L磷酸二氢钾、0.5g/L氯化钠、1g/L氯化铵、1mM硫酸镁、0.1mM氯化钙、10mg/L维他命B1、5g/L酵母萃取物、20g/L葡萄糖。
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