[发明专利]一种复杂基质中二溴氯丙烷残留量的GC‑NCI‑MS检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种二溴氯丙烷残留量的检测方法，更具体地说，涉及一种采用气相色谱-负化学源-质谱法（GC-NCI-MS）定性定量测定动物源性食品等复杂基质中二溴氯丙烷残留量的方法，属于农药残留的检测技术领域。

背景技术

二溴氯丙烷，俗称黑药，学名1，2-二溴-3-氯丙烷，英文名称1，2-Dibromo-3-chloropropane（简称：DBCP），CAS号为96-12-8，分子量236.3328，结构式为：

二溴氯丙烷是液态熏蒸性杀线虫剂的活性成份。它是一种农业上使用的土壤熏蒸剂，适用于蔬菜、花卉、烟草、草莓等作物的苗床和温室大棚的熏蒸，防治根结线虫、孢囊线虫、短体线虫、螺旋线虫、纽带线虫、矮化线虫等。众多研究表明二溴氯丙烷对人体有剧毒，具有高残留、致畸、致不育的特点。在发现它对人类健康造成不良影响之后，此化合物于1979年被禁止及限制使用。但仍有不法分子为取得高效的种植效果，暗地使用该农药，为社会留下不少隐患。

国内外对动物源性食品中二溴氯丙烷的检测研究尚未见开展。已有的关于二溴氯丙烷的检测主要集中在上世纪80年代，且仅仅是针对花生和粮食上的二溴氯丙烷，采用气相色谱技术进行其残留量检测，但前处理手段落后、过程繁琐、检测效率低，且溶剂多为毒性较大的苯、乙烷、浓硫酸等，对人体有较大危害。另外，气相色谱技术无法克服基质干扰、假阳性等问题，不能进行复杂基质中二溴氯丙烷的检测，限制了其使用范围。因此，迫切需要建立一种操作简单、回收率高、重复性好、检出限低、选择性好的方法，适用于动物源性食品等复杂基质中二溴氯丙烷的检测。

发明内容

本发明要解决的问题是针对以上不足，首次提供一种复杂基质中二溴氯丙烷残留量的GC-NCI-MS检测方法，克服传统技术检测步骤繁琐、溶剂用量大且毒性较大、灵敏度低、回收率低、重现性差、方法不适用于动物源性食品等复杂基质的缺陷，采用本发明方法，具有快速简便、溶剂用量小且毒性小、灵敏度高、选择性强、重现性好，适用于各种动物源性食品中二溴氯丙烷检测的优点。

为解决以上问题，本发明采取以下技术方案：一种复杂基质中二溴氯丙烷残留量的GC-NCI-MS检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）提取：称取粉碎好的样品置于具塞离心管中，加入纯乙腈，均质，再加入氯化钠，再次均质，离心；

（2）净化：移取样品提取液上清液于旋蒸瓶中，旋蒸至近干，加入体积比为3：1的乙腈-乙酸乙酯混合溶剂于旋蒸瓶中溶解残渣，经ProElutCARB/NH2固相萃取小柱净化，体积比为3：1的乙腈-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩至近干后，用体积比为1：1的正己烷-丙酮定容，离心，过膜得样品液；

（3）标准工作溶液的配制：采用样品空白基质提取液配制不同浓度标准工作液，然后用标准溶液浓度-色谱峰面积作标准工作曲线；

（4）气相色谱-负化学源-质谱（GC-NCI-MS）测定

将步骤（3）中的各浓度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰面积作出标准工作曲线；

在相同条件下将步骤（2）中得到的样品液进行GC-NCI-MS测定，测得样品中二溴氯丙烷的色谱峰面积，带入标准曲线，得到样品液中二溴氯丙烷的含量，然后根据样品液所代表的质量计算得到样品中二溴氯丙烷的残留量。

以下是对上述技术方案的进一步说明：

步骤（1）中样品若为动物肝脏等含水量较少的样品，需加入称样量五分之一的水，浸泡半小时后进行提取。

步骤（4）中气相色谱条件为：色谱柱HP-5MS毛细管色谱柱，30*0.25*0.25；进样口温度270℃；载气：He气，不分流模式进样，进样量1uL；恒流模式，柱流量1.0mL/min；程序升温：初温50℃保持2min,以每分钟5℃的速度升至180℃，保持5min,然后以每分钟20℃的速度升至210℃，保持5min；传输线温度250℃。

步骤（4）中质谱条件为：离子源温度：200℃；电离模式：NCI；扫描模式：选择离子监测（SIM）模式；甲烷气流量：2ml/min；监测的离子：79、81、160、162，其中162为定量离子。

步骤（4）中测定样品和标准工作溶液时，若两者相应农药的保留时间一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中所选择的离子均出现，且离子丰度比与标准溶液一致，则可判断样品中残留此种农药，若不能同时满足上述两个条件，则判断不含该种农药。