[发明专利]一种NT-proBNP荧光免疫试剂及其制备方法

权利要求书

1.一种NT-proBNP荧光免疫试剂，其特征在于，所述NT-proBNP荧光免疫试剂包括标记用NT-proBNP1抗体、标记用羊抗鸡IgY抗体、包被用NT-proBNP2抗体、包被用鸡IgY抗体、粒子重悬液、样品垫处理液，其中粒子重悬液：含100-200mMTris的Tris-HCl重悬液，pH8-9；样品垫处理液：10mMPBS，pH7-8。

2.根据权利要求1所述的NT-proBNP荧光免疫试剂，其特征在于，所述的Tris-HCl重悬液还含250-500μg/ml鼠IgG，1-5％小牛血清，0.1-0.5％PluronicF68，0.5-1％酪蛋白，0.9％NaCl，0.05％NaN₃。

3.根据权利要求2所述的NT-proBNP荧光免疫试剂，其特征在于，所述的鼠IgG、小牛血清在加入粒子重悬液前均先在55-60℃下处理10min。

4.根据权利要求1所述的NT-proBNP荧光免疫试剂，其特征在于，所述的PBS还含0.1mg/ml-0.5mg/ml植物凝集素。

5.一种如权利要求1-4任一所述的NT-proBNP荧光免疫试剂的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括粒子标记、样品垫预处理、抗体在NC膜上的包被、以及试纸组装，其中，粒子标记为在粒子中同时加入EDC、NHS、BSA，以及NT-proBNP1抗体或羊抗鸡IgY抗体，在45-55℃下交联反应2h；交联后先清洗、乙醇胺封闭，然后用粒子重悬液重悬分别得NT-proBNP1抗体标记的荧光粒子和羊抗鸡IgY抗体标记的荧光粒子，最后将NT-proBNP1抗体标记的荧光粒子和羊抗鸡IgY抗体标记的荧光粒子混合得到粒子浓度分别为0.1-0.5mg/ml和0.001-0.01mg/ml的粒子混合液。

6.根据权利要求5所述的NT-proBNP荧光免疫试剂的制备方法，其特征在于，抗体标记中，在交联反应前，NT-proBNP1抗体和羊抗鸡IgY抗体均分别在45-55℃水浴中孵育24-48小时。