[发明专利]一种用于血型抗体检测的试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种用于血型抗体鉴定和/或检测的试剂盒，包括：固定有血型抗原的固相载体、补体、酶标记的抗补体、显色液，以及采用上述试剂盒进行血型抗体鉴定和/或检测方法。本发明所述的用于血型抗体鉴定和/或检测的试剂盒保存周期长，储存方便，增加了血型抗体检测的便利性，同时本发明所述的血型抗体鉴定和/或检测方法可以定量的检测血液中存在的抗体，实现了血液中弱抗体的检测，避免了现有检测方法中肉眼判断可能造成的人为误差，提高了检测的准确性和重现性，保证了输血安全，并且能够实现用十系及以上谱细胞进行不规则抗体的自动化和批量化检测。

技术领域

本发明属于血型抗体检测和鉴定技术领域，具体涉及一种用于血型抗体检测的试剂盒及其在血型抗体检测中的应用。

背景技术

血型鉴定在输血治疗中非常重要，血型鉴定是基于抗原-抗体反应导致的细胞凝集反应。使用红细胞表面抗原检测血清/血浆中的血型抗体称之为反定型。在临床输血中，必须保证正、反定型法鉴定结果一致，才能确保输血的安全性。目前大多数的反定型试验都是以有活力的红细胞表面抗原作为标准抗原，然而新鲜红细胞不易保存，并且红细胞表面抗原的抗原性随保存时间延长而逐渐降低。这类试剂不仅需要低温保存，且最长保存期只有3至6个月。

现有技术中所建立的红细胞抗体检测方法有试管法、纸片法、微柱凝集检测卡法等。微柱凝集法是目前最常用的检测方法，实验时红细胞抗原与相应抗体的反应在微柱凝集介质中进行，微柱凝集具有分子筛的作用，如果红细胞抗原与相应抗体结合，形成的凝集块经离心后不能通过分子筛而留在凝集介质的上层；如果红细胞与抗体没有结合，反应后没有形成凝集块，则离心后红细胞可以通过分子筛沉淀到底部，从而达到鉴定ABO血型的目的。但是该方法干扰因素多，可能产生假阴性或假阳性检测结果，导致检测结果容易出现误差。

CN103487590B公开了一种血型抗体的间接Dot-ELISA检测方法与应用，所述方法为将硝酸纤维素膜固定于96孔板上，然后直接将红细胞膜包被硝酸纤维素膜上，与待测抗体反应，通过酶标二抗形成抗原-抗体复合物。然而该方法操作复杂，不易实现，需肉眼判断检测结果，易产生误差且无法实现定量检测。

CN1032926A同样公开了将已用酶标记的ABH单克隆抗体用斑点ELISA(酶联免疫吸附法)进行ABO血型测定，通过结合在抗体上的酶作用底物出现颜色变化来判断血型。同样的，上述方法也需通过肉眼观察颜色判断检测结果，易产生误差并无法实现定量检测。

A sandwich enzyme-linked immune-sorbent assay for ABO blood typing ofsemen by using anli-P84 monoclonal antibody as a marker of blood groupsubstance in semen(Sato I et al.，J Forensic Sci，2000，45(4)：795)公开了利用ELISA法测定精液中的血型物质P84，实验利用抗血型物质P84的单克隆抗体包板，捕捉精液或精斑样本中的相应抗原，实验证明即使样本在40℃下保存8个月，样本中仍有超过60％的P84血型物质生物学活性存在，仍然可以用这种办法顺利进行血型物质的鉴定。

为克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种用于血型抗体鉴定和/或检测的试剂盒及应用。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种血型抗体鉴定和/或检测方法，解决了现有检测方法中只能定性或半定量检测血液中血型抗体的缺陷，实现了对血型抗体特别是血液中存在的弱抗体定量鉴定和/或检测，提高了输血的安全性。

本发明的另一个目的是提供一种血型抗体鉴定和/或检测方法，解决了现有检测方法中操作繁琐复杂的问题，能够实现用十系及以上谱细胞进行不规则抗体的自动化和批量化检测。

本发明的再一个目的是提供一种用于血型抗体鉴定和/或检测的试剂盒，解决了现有检测产品中红细胞保存周期过短，检测重现性差、不能实现检测标准化的问题。