[发明专利]联合鉴定小麦对Bipolaris Sorokiniana黑胚病与叶枯病抗性的方法

说明书

本发明公开了一种联合鉴定小麦对B.sorokiniana黑胚病与叶枯病抗性的方法。首先将4℃保存的B.sorokiniana单孢菌株切成块状，接种于PDA培养基上暗培养，培养后将孢子刮下，冲洗、纱布过滤，得到孢子悬浮液，调整孢子浓度；小麦抽穗后，将穗部及旗叶套袋；开花后第6天，将所得B.sorokiniana孢子悬浮液摇匀，喷洒在穗部及旗叶，套袋、保湿；接菌后记录病斑面积百分率和黑胚率，根据记录结果来同时评价小麦对B.sorokiniana黑胚病与叶枯病的抗性。本发明鉴定方法与大田自然发病率鉴定相比，提高了鉴定结果的准确性与可靠性，与两种病害分开鉴定相比，大大提高了鉴定的效率。

一、技术领域：

本发明属于农作物病害检测技术领域，具体涉及一种联合鉴定小麦对小麦根腐平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana黑胚病与叶枯病抗性的方法。

二、背景技术：

黑胚病与叶枯病是小麦的常见病害，黑胚病是指小麦颖果表面有不同形状和程度的黑色、褐色等病变；叶枯病是小麦叶斑和叶枯病害的总称，这两种病的病因复杂，小麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana即B.sorokiniana，中文名称还可称为“小麦根腐病菌”)能同时引起这两种小麦病害，其感染小麦籽粒引起黑胚病，侵染叶片会引起小麦叶枯病。

蠕孢叶枯病在一般的年份可使小麦减产5～20％，严重者减产50％以上(参见朱修涛、常适滔、周春元，小麦叶枯病(HLB)研究进展；农业科技与装备，2010，8:15-18)，小麦黑胚病的严重程度随品种、地点、年份及防治措施等因素的不同而变化，各国报道的发病率一般在0.3～66.7％之间变化(参见：1、Li Q Y,Qin Z,Jiang Y M,Shen C C,Duan Z B,andNiu J S.Screening wheat genotypes for resistance to black point and theeffects of diseased kernels on seed germination.Journal of Plant Diseases andProtection,2014,121(2):79-88；2、Sissons M,Sissons S,and Egan N.The black pointstatus of selected tetraploid species and Australian durum wheat and breedinglines.Crop Science,2010,50:1279-1286.3、康业斌,郭秀璞,成玉梅,刘顺通,谢贞.小麦对黑胚病的抗性及黑胚对种质的影响，麦类作物,1998,4:28-31)。蠕孢菌引起的黑胚病不仅使小麦穗粒数减少、千粒重降低从而影响小麦产量，而且降低籽粒品质，从而影响农民收入，可见蠕孢黑胚病与叶枯病给小麦生产带来严重的危害。

准确、高效的品种抗性鉴定技术是抗病遗传研究、抗病育种和病害防治的基础。目前，小麦品种对黑胚病与叶枯病抗性的鉴定方法主要是基于大田自然发病率。然而，这两种病的发生受病原种类与环境条件等多种因素的影响，同一品种在不同年度、不同地点的发病程度变化很大。所以，基于自然发病情况评价品种抗性的稳定性较差，鉴定结果的可靠性差。虽然也有一些针对黑胚病与叶枯病的接菌鉴定方法的报告，如康业斌等(康业斌，刘顺通，成玉梅，段爱菊.小麦对黑胚病的抗性及黑胚对产量损失的影响，植物保护，1999，3:25-27.)在小麦不同生育期(抽穗期、扬花初期、扬花末期和灌浆初期)接种麦类根腐叶枯病菌(Drechlera sorokiniana)评价小麦对黑胚病抗性及该病对产量的影响，不过接菌后的保湿时间短(连续3天，每天喷水2次保湿)，马骥超(马骥超.小麦抗蠕孢菌叶枯病微卫星标记检测.沈阳农业大学硕士学位论文，2007，中国，沈阳.)用离体叶片孢子液滴接种法鉴定了小麦对B.sorokiniana叶枯病的抗性，由于实验室条件与大田有差异，故实验室的鉴定结果不能充分反应小麦的大田抗性，更重要的是，这些研究将黑胚病与叶枯病两种病害分开鉴定，效率较低。因此，非常有必要研究一种联合鉴定的方法，同时评价小麦对这两种病害的抗性。

三、发明内容：