[发明专利]有机碳生物活性的分析方法

权利要求书

1.有机碳生物活性的分析方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将有机碳配制成水溶液，得有机碳储备液；

2)将步骤1)得到有机碳储备液过滤灭菌；

3)将交替单胞菌Alteromonas macleodii接种到培养基M1中进行前培养，使得菌体浊度达到OD600＝1，将菌液离心，去上清，收集菌体，在菌体中加入NaCl，悬浊后再次离心，最后将菌体用NaCl悬浊，得菌体前培养液；

所述培养基M1的组成为1L中含有BactoPeptone，1.0g；yeastextract,1.0g；KCl，0.3g；MgSO₄·7H₂O，0.5g；CaCl₂·2H₂O，0.038g；NH₄Cl,0.3g；K₂HPO₄，0.3g；NaCl，20.0g；1mL微量元素溶液，pH 7.8；所述微量元素溶液1L中含有FeSO₄·7H₂O，2.1g；H₃BO₃，30mg；MnCl₂·4H₂O，0.1g；CoCl₂·6H₂O，0.19g；CuCl₂·6H₂O，2mg；ZnSO₄·7H₂O，0.144g；Na₂MoO₄·2H₂O，36mg；

4)将储备液M2装入培养瓶中，再加入灭菌蒸馏水、有机碳储备液、菌体前培养液，将培养瓶加盖，放入微活性量热仪中培养，记录培养过程中的热量变化，进行有机碳生物活性分析；

所述储备液M2的成分为1L中含有KCl，0.6g；MgSO₄·7H₂O，1.0g；CaCl₂·2H₂O，0.076g；NH₄Cl，0.6g；K₂HPO₄，0.6g；NaCl，40.0g；2mL微量元素溶液，pH7.8；所述微量元素溶液1L中含有FeSO₄·7H₂O，2.1g；H₃BO₃，30mg；MnCl₂·4H₂O，0.1g；CoCl₂·6H₂O，0.19g；CuCl₂·6H₂O，2mg；ZnSO₄·7H₂O，0.144g；Na₂MoO₄·2H₂O，36mg，pH7.8。

2.如权利要求1所述有机碳生物活性的分析方法，其特征在于在步骤1)中，所述有机碳采用天然有机碳或人工合成有机碳。

3.如权利要求2所述有机碳生物活性的分析方法，其特征在于所述天然有机碳选自糖类、氨基酸、有机酸中的至少一种。

4.如权利要求1所述有机碳生物活性的分析方法，其特征在于在步骤1)中，所述有机碳储备液的pH值为7。

5.如权利要求1所述有机碳生物活性的分析方法，其特征在于在步骤2)中，所述过滤灭菌是用0.22μm已经灭菌的微孔滤膜过滤灭菌。

6.如权利要求1所述有机碳生物活性的分析方法，其特征在于在步骤3)中，所述将菌液离心的条件为8000g离心5min；所述在菌体中加入NaCl的条件为：在菌体中加入与菌体等量的质量百分浓度为0.8％的NaCl。

7.如权利要求1所述有机碳生物活性的分析方法，其特征在于在步骤3)中，所述悬浊后再次离心的条件为8000g再离心5min；所述最后将菌体用NaCl悬浊的条件为：将菌体用与菌体等量的质量百分浓度为0.8％的NaCl悬浊。

8.如权利要求1所述有机碳生物活性的分析方法，其特征在于在步骤4)中，所述储备液M2、灭菌蒸馏水、有机碳储备液、菌体前培养液的体积比为1∶0.6∶0.2∶0.2，培养瓶的容积为4ml，最终培养体系为2ml。