[发明专利]一类两亲性吲哚方酸菁染料及其长效标记溶酶体的应用

权利要求书

1.一种两亲性吲哚方酸菁染料，其特征在于，其结构式为：

其中，R为H，Br，或CH₃。

2.一种两亲性吲哚方酸菁染料的合成方法，其特征在于，其具体操作步骤为：

1).将10-20mmol4-R基苯肼盐酸盐及10-24mmol3-甲基-2-丁酮加入到5-20mL的冰醋酸中，回流反应8-20小时，悬蒸除去溶剂后，用二氯甲烷溶解，并用饱和NaHCO₃水溶液洗涤至水相无色、pH中性，取有机相旋蒸除去溶剂，得到5-R基-2，3，3-三甲-3H-基吲哚；

2).将3-10mmol的5-R基-2，3，3-三甲-3H-基吲哚与3-12mmol的对卞溴基苯甲酸加入10-20mL乙腈中，回流反应10-20小时，旋蒸除去溶剂后用乙醚沉淀并洗涤，干燥后得到中间产物吲哚啉衍生物；

3).将1-5mmol步骤2)合成的吲哚啉衍生物与0.5-2.5mmol的3,4-二羟基-3-环丁烯-1,2-二酮加入10-20mL甲苯和正丁醇的混合溶液中，甲苯和正丁醇的体积比为1:0.8-1.5，并加入5-10mL吡啶；在氮气保护下，缓慢升温至100-120℃，15-30小时后用乙醚沉淀得到中间产物吲哚方酸菁衍生物；

4).将0.5-1mmol步骤3)合成的吲哚方酸菁衍生物、2-4mmol的2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯和2-4mmol二异丙基乙胺加入5-10mmolN,N-二甲基甲酰胺中，室温下反应15-30分钟后加入N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺4-5mmol，继续室温下反应2-8小时后用乙醚沉淀得到叔丁氧羰基保护的吲哚方酸菁衍生物；

5).将0.1-1mmol叔丁氧羰基保护的吲哚方酸菁衍生物与5-10mL三氟乙酸加入至5-10mL二氯甲烷中，室温下反应2-10小时后旋蒸除去溶剂并用乙醚沉淀，得到两亲性吲哚方酸菁染料；

步骤1)和2)中的R为H，Br，或CH₃。

3.根据权利要求1所述的两亲性吲哚方酸菁染料在活细胞中标记溶酶体的应用。