[发明专利]番茄晚疫病菌PCR检测引物、试剂盒及检测方法有效
| 申请号： | 201510563440.2 | 申请日： | 2015-09-08 |
| 公开（公告）号： | CN105063040B | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 兰成忠;何玉仙;赵建伟;阮宏椿 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350013 福建省福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 番茄晚疫病菌 番茄晚疫病 引物 番茄植物 过程操作 扩增产物 上游引物 特异性强 土壤样品 晚疫病菌 下游引物 有效防治 早期诊断 重要意义 灵敏度 检测 可用 扩增 病菌 田间 监测 | ||
1.番茄晚疫病菌PCR检测引物，其特征在于：所述引物序列为：
上游引物PIF：5'- GCCATGTCCGGTATTACCAC -3'，
下游引物PIR：5'- GCTCATCTTCAGACCCTTGG -3'；
对番茄晚疫病菌特异性扩增出399bp的产物。
2.一种如权利要求1所述引物在番茄晚疫病菌PCR检测试剂盒中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述试剂盒包含如下试剂：重量浓度≥99%的超纯水，2×
4.一种如权利要求1所述引物用于番茄晚疫病菌PCR检测方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）提取待测样品基因组DNA；
（2）以步骤（1）提取的DNA为模板进PCR反应，PCR扩增的条件为：PCR反应体系25 µL，包括2×
（3）取5.0 µL步骤（2）的PCR扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶进行电泳分离，电泳分离后经溴化乙锭染色于紫外灯下观察，根据扩增产物的有无及其片段大小对结果进行判断，能特异性地扩增出399bp的产物，即判断所述的检测样品中存在番茄晚疫病菌。
5.如权利要求1所述的引物在田间番茄晚疫病的早期诊断和病菌的监测和鉴定上的应用。
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