[发明专利]一种弓形虫GRA10复合表位肽及其制备的疫苗有效
| 申请号： | 201510563797.0 | 申请日： | 2015-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN105153292B | 公开（公告）日： | 2018-07-03 |
| 发明（设计）人： | 丛华;尹绘权;张晓丽;丛海滋;周怀瑜;何深一 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C07K14/45 | 分类号： | C07K14/45;C12N15/30;A61K39/002;A61K47/36;A61P33/02 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 250061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 弓形虫 复合表 疫苗 壳聚糖微球 有效地 包囊 制备 体液免疫和细胞免疫 宿主 弓形虫感染 乳化交联法 候选疫苗 免疫小鼠 微球疫苗 脑组织 攻击 表位 三段 小鼠 存活 装载 大脑 筛选 预防 | ||
1.一种弓形虫GRA10复合表位肽，其特征在于，该复合表位肽的序列为SGFSLSSGSGVSVVEGSLGYCALLPLGSTQSPPESRKKRRRSGKKKRGKRSV。
2.编码权利要求1所述复合表位肽的核酸。
3.权利要求1所述肽或权利要求2所述核酸用于制备弓形虫疫苗的应用。
4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述疫苗用于预防人或动物弓形虫病。
5.根据权利要求3或4所述应用，其特征在于，所述疫苗用于控制弓形虫急性或慢性感染。
6.一种弓形虫GRA10复合表位肽壳聚糖微球疫苗的制备方法，其特征在于，制备获得权利要求1所述弓形虫GRA10复合表位肽，然后用乳化交联法获得壳聚糖微球颗粒，使之吸附结合GRA10复合表位肽，最终获得装载GRA10复合表位肽的壳聚糖微球疫苗。
7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，将壳聚糖原材料溶于醋酸中作为水相，制备含有Span80的液体石蜡作为油相，将水相逐滴加入油相，机械搅拌，逐渐滴加戊二醛，搅拌收集产物，清洗，冻干，获得空白壳聚糖微球颗粒；将弓形虫GRA10复合表位肽和乳化交联法获得的壳聚糖微球置于4℃连续震荡24小时，获得装载弓形虫GRA10复合表位肽的壳聚糖微球疫苗。
8.根据权利要求6或7所述方法，其特征在于，将壳聚糖原材料溶于2%醋酸中作为水相，制备含有5%Span80的液体石蜡作为油相，将水相逐滴加入油相，机械搅拌2h，逐渐滴加25%戊二醛，继续搅拌2h，3000rpm收集产物，依次用石油醚、异丙醇和蒸馏水各清洗3次，置于真空冷冻干燥机冻干，获得空白壳聚糖微球颗粒；将弓形虫GRA10复合表位肽和乳化交联法获得的壳聚糖微球置于4℃连续震荡24小时，获得装载弓形虫GRA10复合表位肽的壳聚糖微球疫苗。
9.根据权利要求6-8任一项所述方法制备得到的弓形虫GRA10复合表位肽壳聚糖微球疫苗。
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